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免疫熒光檢測(cè) Immunofluorescence Detection

實(shí)驗(yàn)原理

 

  細(xì)胞免疫化學(xué)與免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)都是依據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色的原理,采用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)抗原的分布進(jìn)行原位檢測(cè)技術(shù)。細(xì)胞免疫化學(xué)將培養(yǎng)處理后的細(xì)胞爬片、固定、破膜、封閉后,加入一抗與抗原蛋白結(jié)合,再加入標(biāo)記有熒光素的二抗與一抗進(jìn)行反應(yīng),最后通過(guò)激光共聚焦掃描顯微鏡進(jìn)行熒光拍攝來(lái)顯示細(xì)胞中靶蛋白的表達(dá)變化和定位。

實(shí)驗(yàn)流程

 

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示

 

圖1 細(xì)胞目的蛋白的confocal拍攝照片
A:細(xì)胞白光照片;B:標(biāo)記紅色熒光的目的蛋白;C:標(biāo)記綠色熒光的目的蛋白;
D:DAPI進(jìn)行核染;E:A-D圖片的重疊圖片。