RIPA組織/細(xì)胞裂解液與非變性組織細(xì)胞裂解液的應(yīng)用
RIPA組織/細(xì)胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細(xì)胞膜（包括核膜）。而非變性組織/細(xì)胞裂解緩沖液內(nèi)含非離子型去垢劑，能裂解細(xì)胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產(chǎn)物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗體結(jié)合或酶學(xué)活性，因此適宜于進(jìn)行免疫共沉淀。另外，有些抗體對(duì)非變性蛋白具有更高的結(jié)合能力或只能識(shí)別非變性蛋白的抗原位點(diǎn)，這種情況應(yīng)該使用非變性裂解。
細(xì)胞裂解液的裂解作用：
主要是裂解液處理法，細(xì)胞裂解液的主要目的有以下幾種：
利用去污劑破壞脂質(zhì)雙分子層，破裂細(xì)胞；
溶解蛋白；
蛋白變性使其穩(wěn)定；
抑制蛋白酶活性。
主要根據(jù)不同的目的，裂解液的組成有所不同，主要有提取核酸和蛋白兩中。在提取RNA或DNA時(shí)，我們主要是要充分裂解細(xì)胞，得到更多的核酸；如果我們的目的是蛋白，那要根據(jù)蛋白的位置、特性等因素考慮裂解液，在提取蛋白后，再根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要復(fù)性蛋白等。 細(xì)胞裂解中常用試劑和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（緩沖體系），150 mM NaCl（等滲體系），1 mM PMSF （強(qiáng)大的蛋白酶抑制劑），1 mM EDTA（變性劑和穩(wěn)定劑），5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制劑），5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制劑），1% Triton x-100（破壞細(xì)胞），1% Sodium deoxycholate（中度變性劑和蛋白溶解劑），0.1% SDS（強(qiáng)變性劑和蛋白溶解劑）。7M 尿素，2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解），蛋白酶K等。
北京諾博萊德科技有限公司自產(chǎn)產(chǎn)品非變性組織/細(xì)胞裂解液,用于對(duì)非變性蛋白具有更高的結(jié)合能力或只能識(shí)別非變性蛋白的抗原位點(diǎn)的裂解。具有裂解作用的產(chǎn)品還有R0010,高效 RIPA組織/細(xì)胞裂解液和R0020,RIPA組織/細(xì)胞裂解液等。
北京諾博萊德科技有限公司自產(chǎn)組織細(xì)胞裂解液的區(qū)別：
名稱 ：高效RIPA組織細(xì)胞裂解液
有效裂解成分： SDS，NP-40，脫氧膽酸鈉，
裂解強(qiáng)度 ： 強(qiáng)
蛋白酶抑制劑 ：含, 配有PMSF
蛋白狀態(tài)： 變性
主要用途 ： WB、IP
名稱 ： RIPA組織細(xì)胞裂解液
有效裂解成分 ： 1% NP-40，0.1% SDS
裂解強(qiáng)度 ： 中
蛋白酶抑制劑 ： 含，配有PMSF
蛋白狀態(tài) ： 變性
主要用途 ： WB、IP
名稱 ： 非變性組織細(xì)胞裂解液
有效裂解成分 ：NP-40，Triton X-100
裂解強(qiáng)度 ： 溫和
蛋白酶抑制劑 ： 含，配有PMSF
蛋白狀態(tài) ：保持活性狀態(tài)
主要用途 ： WB, IP,co-IP
