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產(chǎn)品名稱：高保真PCR Mix
產(chǎn)品內(nèi)容：

組分	PCR09-1	PCR09-5
2xNobleRyder Master Mix (Dye Plus)	1 mL	4×1.25 mL

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
2 x NobleRyder HiFi Master Mix包含NobleRyder HiFi DNA Polymerase、dNTP、Mg²⁺及經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖體系，擴(kuò)增效率高，擴(kuò)增速度快，具有高保真性和高特異性，僅需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增，減少了繁瑣的試驗(yàn)操作，提高了實(shí)驗(yàn)操作效率和結(jié)果的復(fù)現(xiàn)性。2 x NobleRyder HiFi Master Mix (Dye Plus)擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳，產(chǎn)品如用于克隆，需經(jīng)純化去除PCR產(chǎn)物中的染料。兩種產(chǎn)品的PCR產(chǎn)物均為平末端，可用于高保真PCR，基因定點(diǎn)突變，平端克隆，復(fù)雜模板，長(zhǎng)片段擴(kuò)增等。
注意事項(xiàng)：
1. 請(qǐng)于使用前確保產(chǎn)品完全解凍，徹底混勻后短暫離心，置于冰上備用。
2. 反復(fù)凍融會(huì)影響產(chǎn)品的性能。
3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
實(shí)驗(yàn)流程：
配制檢測(cè)試劑

試劑	體積	終濃度
2 x NobleRyder HiFi Master Mix	25 μL	1x
正向引物 (10μM)	1~2 μL	0.2~0.4μM*
反向引物 (10μM)	1~2 μL	0.2~0.4μM*
模板 DNA	X μL*	/
DNase-free Water	As required	/
Total Volume	Up to 50 μL	/

*通常每條引物終濃度為 0.2~0.4 μM，效果不佳時(shí)也可在 0.1~1 μM 間進(jìn)行調(diào)整。
*基因組DNA推薦用量為10~400ng，模板為質(zhì)?；虿《綝NA時(shí)，推薦用量為10pg~20ng。

反應(yīng)程序設(shè)置

95℃	3~5 min	預(yù)變性
95℃	15 sec
58℃*	20 sec	30-35cycles
72℃	2~4kb/min
72℃	5 min	終延伸

* 退火溫度需要根據(jù)引物的 Tm 值進(jìn)行調(diào)整，一般設(shè)置成低于引物 Tm 3~5℃。