產(chǎn)品說明：
描述
通過細胞內(nèi)染色檢測細胞因子細胞內(nèi)積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細胞群以誘導目標細胞因了的產(chǎn)生。如果沒有在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑存在下培養(yǎng)的適當活化的產(chǎn)生細胞因子的細胞，在大多數(shù)情況下檢測細胞因子細胞內(nèi)積累的能力會受到嚴重損害。已經(jīng)報道了各種刺激細胞產(chǎn)生細胞因子的體外方法。多克隆激活劑對于誘導產(chǎn)生細胞因子的細胞特別有用。這些激活劑包括:刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波醇酶加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、腸毒素葡球菌 B和靶向 TCR/CD3 復合物亞基的單克隆抗體 (伴或不伴靶向共刺激受體的抗體，如 CD28)。
含有BD高爾基體的“白細胞活化混合物是一種即用型多克隆細胞活化混合物，含有佛波醇、PMA(佛波醇12-肉豆酸13-乙酸)、離子載體(離子素)和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑BD高爾基體m(Brefeldin A) 。該混合物可用于引發(fā)T細胞的初級細胞因子反應。使用這種混合物刺激細胞導致細胞因子的產(chǎn)生，該細胞因子位于產(chǎn)生細胞因子的細胞的粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中細胞因子的這種定位是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑成分Brefeldin A引起的，該成分阻斷細胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運過程。因此，細胞中細胞因子蛋白水平的增加通過免疫熒光染色和流式細胞術(shù)分析增強了產(chǎn)生細胞因子的細胞的可檢測性。每個 100 L 樣品瓶的內(nèi)容物足以處理多達 50 mL 的細胞培養(yǎng)物 (~10^6 個細胞/mL) ;因此，可以刺激≥5 x 10^7 個細胞。
制備和儲存
使用前將產(chǎn)品儲存在-80°C 下或長期儲存儲備溶液。
推薦的檢測程序
使用白細胞活化混合物的程序，BD高爾基體塞而: 在37”C的水浴中快速解凍混合物，每1mL細胞培養(yǎng)物加入2pL混合物(例如，~10^6個細胞/ mL) 并充分混合。將培養(yǎng)物置于 37°C 加濕的 CO2 培養(yǎng)箱中 4-6 小時?；罨?，用FACS染色緩沖液(例如，BD PharmingenT"染色緩沖液，F(xiàn)BS，Cat.編號 554656) 用于抗體染色方案。用白細胞活化混合物處理刺激細胞4至6小時，BD GolgiPlug可顯著提高通過免疫熒光染色檢測產(chǎn)生細胞因子的細胞的能力。建議使用BD高爾基體塞的白細胞活化混合物在細胞培養(yǎng)物中保存的時間不要超過12小時。BD高爾基體對細胞內(nèi)細胞因子染色具有不同的影響，即時間、激活劑和細胞因子依賴性，因此需要激活細胞超過4-6小時的時間可以由研究者根據(jù)經(jīng)驗確定
描述
通過細胞內(nèi)染色檢測細胞因子細胞內(nèi)積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細胞群以誘導目標細胞因了的產(chǎn)生。如果沒有在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑存在下培養(yǎng)的適當活化的產(chǎn)生細胞因子的細胞，在大多數(shù)情況下檢測細胞因子細胞內(nèi)積累的能力會受到嚴重損害。已經(jīng)報道了各種刺激細胞產(chǎn)生細胞因子的體外方法。多克隆激活劑對于誘導產(chǎn)生細胞因子的細胞特別有用。這些激活劑包括:刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波醇酶加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、腸毒素葡球菌 B和靶向 TCR/CD3 復合物亞基的單克隆抗體 (伴或不伴靶向共刺激受體的抗體，如 CD28)。
含有BD高爾基體的“白細胞活化混合物是一種即用型多克隆細胞活化混合物，含有佛波醇、PMA(佛波醇12-肉豆酸13-乙酸)、離子載體(離子素)和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑BD高爾基體m(Brefeldin A) 。該混合物可用于引發(fā)T細胞的初級細胞因子反應。使用這種混合物刺激細胞導致細胞因子的產(chǎn)生，該細胞因子位于產(chǎn)生細胞因子的細胞的粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中細胞因子的這種定位是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑成分Brefeldin A引起的，該成分阻斷細胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運過程。因此，細胞中細胞因子蛋白水平的增加通過免疫熒光染色和流式細胞術(shù)分析增強了產(chǎn)生細胞因子的細胞的可檢測性。每個 100 L 樣品瓶的內(nèi)容物足以處理多達 50 mL 的細胞培養(yǎng)物 (~10^6 個細胞/mL) ;因此，可以刺激≥5 x 10^7 個細胞。
制備和儲存
使用前將產(chǎn)品儲存在-80°C 下或長期儲存儲備溶液。
推薦的檢測程序
使用白細胞活化混合物的程序，BD高爾基體塞而: 在37”C的水浴中快速解凍混合物，每1mL細胞培養(yǎng)物加入2pL混合物(例如，~10^6個細胞/ mL) 并充分混合。將培養(yǎng)物置于 37°C 加濕的 CO2 培養(yǎng)箱中 4-6 小時?；罨?，用FACS染色緩沖液(例如，BD PharmingenT"染色緩沖液，F(xiàn)BS，Cat.編號 554656) 用于抗體染色方案。用白細胞活化混合物處理刺激細胞4至6小時，BD GolgiPlug可顯著提高通過免疫熒光染色檢測產(chǎn)生細胞因子的細胞的能力。建議使用BD高爾基體塞的白細胞活化混合物在細胞培養(yǎng)物中保存的時間不要超過12小時。BD高爾基體對細胞內(nèi)細胞因子染色具有不同的影響，即時間、激活劑和細胞因子依賴性，因此需要激活細胞超過4-6小時的時間可以由研究者根據(jù)經(jīng)驗確定
