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產(chǎn)品說明：
用SR101-FLISP絲氨酸蛋白酶試驗(yàn)檢測活性絲氨酸蛋白酶。該體外分析采用紅色熒光標(biāo)簽sulforhodamine 101（也稱為德克薩斯紅）?), 與目標(biāo)氨基酸苯丙氨酸和氯甲基酮（CMK）反應(yīng)基團(tuán)相連，形成熒光抑制劑探針SR101 Phe CMK。SR101-FLISP標(biāo)記活細(xì)胞中活性糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶。使用熒光顯微鏡、熒光平板閱讀器或流式細(xì)胞儀分析樣品。
絲氨酸蛋白酶是一類蛋白水解酶，其定義是在酶的活性中心存在絲氨酸殘基。激活的絲氨酸蛋白酶在幾個(gè)不同的功能中發(fā)揮著重要作用，包括：細(xì)胞凋亡、腫瘤惡性標(biāo)志物、乳腺癌和頭頸癌的診斷和預(yù)后指標(biāo)。絲氨酸蛋白酶活性在與移植排斥和感染相關(guān)的多種其他細(xì)胞介導(dǎo)疾病中也發(fā)生改變。這類酶中最具特征的是胰蛋白酶和糜蛋白酶。所有活細(xì)胞都有一個(gè)基本水平的糜蛋白酶樣酶活性，這將隨著細(xì)胞的生理狀態(tài)以及細(xì)胞類型而變化。由于絲氨酸蛋白酶在凋亡過程中起支持作用，因此，與相同細(xì)胞類型的健康細(xì)胞相比，凋亡細(xì)胞群體中的絲氨酸蛋白酶活性更高。半胱天冬酶的激活是上游的，可能是絲氨酸蛋白酶激活的先決條件。FLISP可與FLICA結(jié)合使用，以區(qū)分同一細(xì)胞中的絲氨酸蛋白酶活性和半胱天冬酶活性。
 
FLISP試劑SR101 Phe-CMK進(jìn)入每個(gè)細(xì)胞并與激活的糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶結(jié)合。由于SR101 Phe-CMK-FLISP試劑與活性酶共價(jià)偶聯(lián)，因此它保留在細(xì)胞內(nèi)，而任何未結(jié)合的SR101 Phe-CMK-FLISP試劑擴(kuò)散出細(xì)胞并被沖走。剩余的紅色熒光信號(hào)直接測量添加試劑時(shí)細(xì)胞中存在的活性糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶活性。含有結(jié)合FLISP的細(xì)胞可通過熒光平板讀取器、熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。用FLISP試劑標(biāo)記的細(xì)胞可立即讀取或使用試劑盒中的固定劑保存16小時(shí)。樣品也可使用Hoechst 33342（包括在試劑盒中）進(jìn)行分析，以檢測核形態(tài)的變化。