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FAM FLISP FLDAP絲氨酸蛋白酶測(cè)定 FAM FLISP FLDAP Serine Protease Assay 
FAM FLISP FLDAP Serine Protease Assay 
產(chǎn)品編號(hào): YZ-967  CAS號(hào):  
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FAM FLISP FLDAP絲氨酸蛋白酶測(cè)定 FAM FLISP FLDAP Serine Protease Assay
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產(chǎn)品說(shuō)明:
用FAM-FLISP絲氨酸蛋白酶試驗(yàn)檢測(cè)活性絲氨酸蛋白酶。該體外分析采用綠色熒光標(biāo)記羧熒光素(FAM),其與目標(biāo)氨基酸亮氨酸連接,以及二苯基1-(N-肽氨基)烷膦酸鹽(DAP)反應(yīng)基團(tuán),形成熒光抑制劑探針FAM-Leu-DAP。FAM-FLISP標(biāo)記活細(xì)胞中活性糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶。使用熒光顯微鏡、熒光平板閱讀器或流式細(xì)胞儀分析樣品。
絲氨酸蛋白酶是一類蛋白水解酶,其定義是在酶的活性中心存在絲氨酸殘基。激活的絲氨酸蛋白酶在幾個(gè)不同的功能中發(fā)揮著重要作用,包括:細(xì)胞凋亡、腫瘤惡性標(biāo)志物、乳腺癌和頭頸癌的診斷和預(yù)后指標(biāo)。絲氨酸蛋白酶活性在與移植排斥和感染相關(guān)的多種其他細(xì)胞介導(dǎo)疾病中也發(fā)生改變。這類酶中最具特征的是胰蛋白酶和糜蛋白酶。所有活細(xì)胞都有一個(gè)基本水平的糜蛋白酶樣酶活性,這將隨著細(xì)胞的生理狀態(tài)以及細(xì)胞類型而變化。由于絲氨酸蛋白酶在凋亡過(guò)程中起支持作用,因此,與相同細(xì)胞類型的健康細(xì)胞相比,凋亡細(xì)胞群體中的絲氨酸蛋白酶活性更高。半胱天冬酶的激活是上游的,可能是絲氨酸蛋白酶激活的先決條件。FLISP可與FLICA結(jié)合使用,以區(qū)分同一細(xì)胞中的絲氨酸蛋白酶活性和半胱天冬酶活性。
 
FLISP試劑FAM-Leu-DAP進(jìn)入每個(gè)細(xì)胞并與激活的糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶結(jié)合。由于FAM-Leu-DAP-FLISP試劑與活性酶共價(jià)偶聯(lián),因此它保留在細(xì)胞內(nèi),而任何未結(jié)合的FAM-Leu-DAP-FLISP試劑擴(kuò)散出細(xì)胞并被沖走。剩余的綠色熒光信號(hào)直接測(cè)量添加試劑時(shí)細(xì)胞中存在的活性糜蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶活性。含有結(jié)合FLISP的細(xì)胞可通過(guò)熒光平板讀取器、熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。用FLISP試劑標(biāo)記的細(xì)胞可立即讀取或使用試劑盒中的固定劑保存16小時(shí)。也可使用碘化丙啶或Hoechst 33342(也包括在試劑盒中)分析未固定的樣品,以分別檢測(cè)壞死或核形態(tài)的變化。