• PVDF膜是疏水性的，膜孔徑有大有小，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。
• PVDF膜在使用是需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結(jié)合。
• PVDF膜具有較高的機械強度，是印跡法中的理想固相支持物材料。

剛開始做WB的人也許會有這種疑問：為什么實驗室的老師（或者師兄師姐們）在教我們做WB的時候，如果是用PVDF膜做，總是小心翼翼的剪，節(jié)省著用，甚至一些邊邊角角也舍不得丟掉呢？其實，這不僅是因為PVDF膜比較貴，還由于PVDF膜是做WB的“殺手锏”。

聚偏二氟乙烯（PVDF）膜作為基質(zhì)的轉(zhuǎn)印膜由Millipore公司在1985年首先推出。與硝酸纖維素膜相比，PVDF膜在蛋白質(zhì)截留能力，機械強度和化學(xué)相容性上都更優(yōu)越的性能（Pluskal,et al.,1986)。市售硝酸纖維素膜的典型結(jié)合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜結(jié)合量是100-200μg/cm2（而結(jié)合強度PVDF比硝纖膜強6倍！）。在艾滋病毒（HIV）血清學(xué)檢驗中直接比較PVDF和硝酸纖維素膜，PVDF膜具有更好的截留總HIV抗原能力并提高抗體檢測糖基化被膜抗原的性能。但是PVDF膜最大的優(yōu)點不僅于此：更好的機械強度和化學(xué)耐受性使PVDF膜在各種染色應(yīng)用和多重免疫檢測中成為理想選擇；而且單個凝膠的泳道復(fù)本可用于多種目的，如考馬斯亮藍染色后切出條帶并進行N-末端測序、蛋白消化/肽分離/內(nèi)部測序和免疫檢測（Kurien,et al.,2003)。特別是需要做N端蛋白測序，在相當(dāng)“嚴酷”的清洗條件下，當(dāng)尼龍或者硝纖膜已經(jīng)降解的情況下PVDF膜依然保持本色，笑傲江湖。所以PVDF也是要做蛋白測序的唯一選擇。此外，個人經(jīng)驗，一些強疏水蛋白用PVDF膜效果會更好一些。PVDF膜適用的檢測方法也不少，化學(xué)發(fā)光、常規(guī)顯色、同位素和標(biāo)準染色都一樣OK，但不適合熒光。PVDF膜特別注意的是需要100%甲醇預(yù)處理（不超過15秒）再用緩沖液平衡，才能用，而且適用過程中萬一干了也要同樣程序再處理（不過要真出現(xiàn)這種問題也是自己欠扁，誰要你不小心呢，轉(zhuǎn)膜前處理也就罷了，轉(zhuǎn)膜后再這樣處理可能會影響后繼的抗體識別呢）。PVDF膜同樣分0.45um和0.2um的，后者孔徑小，對小分子蛋白有較好的攔截吸附，背景可能會比前者稍高。