預(yù)期用途:
細胞因子 ELISPOT(酶聯(lián)免疫 SPOT)測定旨在枚舉淋巴組織、中樞神經(jīng)系統(tǒng) (CNS) 組織、骨髓或外周血單核細胞 (PBMC) 制劑的單細胞懸液中的細胞因子分泌細胞。該測定具有僅檢測活化/記憶T細胞的優(yōu)點,并且能夠檢測單個細胞響應(yīng)抗原的細胞因子釋放,從而允許直接計算應(yīng)答性T細胞頻率。高靈敏度和簡便的性能,無需事先體外擴增即可測定肽反應(yīng)性T細胞,使ELISPOT測定非常適合監(jiān)測T細胞反應(yīng)。與 ELISA (1) 或細胞內(nèi)染色 (2) 相比,僅供研究使用版本 111025 ELISPOT 的靈敏度更高,這是由于板結(jié)合抗體直接捕獲細胞釋放的細胞因子,然后將其稀釋在上清液中、被高親和力受體捕獲或被蛋白酶降解。該測定的靈敏度有助于測量非常低頻率的細胞因子分泌細胞(1/300,000)。
1. Tanguay, S. and Killion, J.J. 1994. Lymphokine Cytokine Res. 13: 259.
2. Carter, L.L. and Swain, S.L. 1997. Curr. Opin. Immunol. 9: 177.
簡要說明 ELISPOT 測定
將細胞在預(yù)包被高親和力單克隆抗體的ELISPOT板的孔中孵育,孵育期間產(chǎn)生的細胞因子將與其結(jié)合。隨后,細胞被洗掉。細胞因子結(jié)合的區(qū)域用生物su化的抗細胞因子檢測抗體和偶聯(lián)物的組合進行檢測。測定的最后一步是添加揭示細胞因子分泌部位(即斑點形成)的底物。
ELISPOT程序可以在PVDF膜或聚苯乙烯底板上進行預(yù)成型(見下文)。
內(nèi)容
10-plate format
2瓶,以凍干形式提供抗細胞因子包被抗體;每個小瓶含有足夠的抗體來包被五個96孔ELISPOT板。
2 瓶以凍干形式提供的生物su化檢測抗體;每個小瓶含有足夠的抗體,可用于五個96孔ELISPOT板。
20-plate format
1 瓶含有凍干形式的抗細胞因子包衣抗體;小瓶含有足夠的抗體來包被 20 個 96 孔 ELISPOT 板。
1 瓶含有以凍干形式提供的生物su化檢測抗體;小瓶含有足夠的抗體,可用于 20 個 96 孔 ELISPOT 板。
儲存試劑
帶有凍干包衣和檢測器抗體的小瓶可以在冰箱中安全地存放一段時間(小瓶上標明的有效期)。復(fù)溶后,試劑在保持無菌時在 4°C 下可穩(wěn)定至少 6 個月。但是,強烈建議將重組的抗體制劑分成小等分試樣以供一次性使用。這些等分試樣應(yīng)儲存在-20°C。 在這些條件下,試劑至少可以穩(wěn)定兩年。
細胞因子 ELISPOT(酶聯(lián)免疫 SPOT)測定旨在枚舉淋巴組織、中樞神經(jīng)系統(tǒng) (CNS) 組織、骨髓或外周血單核細胞 (PBMC) 制劑的單細胞懸液中的細胞因子分泌細胞。該測定具有僅檢測活化/記憶T細胞的優(yōu)點,并且能夠檢測單個細胞響應(yīng)抗原的細胞因子釋放,從而允許直接計算應(yīng)答性T細胞頻率。高靈敏度和簡便的性能,無需事先體外擴增即可測定肽反應(yīng)性T細胞,使ELISPOT測定非常適合監(jiān)測T細胞反應(yīng)。與 ELISA (1) 或細胞內(nèi)染色 (2) 相比,僅供研究使用版本 111025 ELISPOT 的靈敏度更高,這是由于板結(jié)合抗體直接捕獲細胞釋放的細胞因子,然后將其稀釋在上清液中、被高親和力受體捕獲或被蛋白酶降解。該測定的靈敏度有助于測量非常低頻率的細胞因子分泌細胞(1/300,000)。
1. Tanguay, S. and Killion, J.J. 1994. Lymphokine Cytokine Res. 13: 259.
2. Carter, L.L. and Swain, S.L. 1997. Curr. Opin. Immunol. 9: 177.
簡要說明 ELISPOT 測定
將細胞在預(yù)包被高親和力單克隆抗體的ELISPOT板的孔中孵育,孵育期間產(chǎn)生的細胞因子將與其結(jié)合。隨后,細胞被洗掉。細胞因子結(jié)合的區(qū)域用生物su化的抗細胞因子檢測抗體和偶聯(lián)物的組合進行檢測。測定的最后一步是添加揭示細胞因子分泌部位(即斑點形成)的底物。
ELISPOT程序可以在PVDF膜或聚苯乙烯底板上進行預(yù)成型(見下文)。
內(nèi)容
10-plate format
2瓶,以凍干形式提供抗細胞因子包被抗體;每個小瓶含有足夠的抗體來包被五個96孔ELISPOT板。
2 瓶以凍干形式提供的生物su化檢測抗體;每個小瓶含有足夠的抗體,可用于五個96孔ELISPOT板。
20-plate format
1 瓶含有凍干形式的抗細胞因子包衣抗體;小瓶含有足夠的抗體來包被 20 個 96 孔 ELISPOT 板。
1 瓶含有以凍干形式提供的生物su化檢測抗體;小瓶含有足夠的抗體,可用于 20 個 96 孔 ELISPOT 板。
儲存試劑
帶有凍干包衣和檢測器抗體的小瓶可以在冰箱中安全地存放一段時間(小瓶上標明的有效期)。復(fù)溶后,試劑在保持無菌時在 4°C 下可穩(wěn)定至少 6 個月。但是,強烈建議將重組的抗體制劑分成小等分試樣以供一次性使用。這些等分試樣應(yīng)儲存在-20°C。 在這些條件下,試劑至少可以穩(wěn)定兩年。