培養(yǎng)基特點(diǎn)
SIM SF 培養(yǎng)基為澄清淡黃色透明液體，如果一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)勿使用。
保存條件
2~8℃避光保存，一旦過期，請(qǐng)勿使用。
穩(wěn)定性及保質(zhì)期
室溫下一個(gè)星期內(nèi)穩(wěn)定。
自收到之日起， 2~8℃避光保存，12個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
細(xì)胞凍存：
選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，保證活率大于90%。
制備細(xì)胞凍存液：45%新鮮培養(yǎng)基，45%條件培養(yǎng)基，10%DMSO。
200g離心5分鐘，棄去上清。
用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，取樣計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度；
迅速轉(zhuǎn)移重懸的細(xì)胞至無菌的凍存管中，每管1~2ml。
迅速分裝細(xì)胞至無菌的凍存管中，每管 1~2 mL，密封。
將凍存管放入程序降溫盒中，-80℃冰箱放置過夜； 如需要長期保存，在液氮罐中保存。
細(xì)胞復(fù)蘇：
迅速取出凍存的 SF9/SF21 細(xì)胞，在 27℃水浴解凍（可以在水中輕輕晃動(dòng)，時(shí)間控制在 1 min 內(nèi)）；
對(duì)凍存管表面消毒；將融化的細(xì)胞轉(zhuǎn)至無菌的含 5-10 mL新鮮培養(yǎng)基的無菌離心管中;
200 g 低速離心 5 分鐘，緩慢倒掉上部培養(yǎng)基，切勿將沉降的細(xì)胞懸起；
用 10-20 mL 新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，確保重懸后的細(xì)胞密度大于 1×106cells/mL 左右；
將重懸的細(xì)胞放入無菌培養(yǎng)瓶中，旋蓋擰松，放在搖床中懸浮培養(yǎng);
當(dāng)細(xì)胞密度生長達(dá)到 2~4×106/mL 時(shí)，可以進(jìn)行傳代，傳代時(shí)細(xì)胞接種密度為 0.8-1×106/mL。
SIM SF 培養(yǎng)基為澄清淡黃色透明液體，如果一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)勿使用。
保存條件
2~8℃避光保存，一旦過期，請(qǐng)勿使用。
穩(wěn)定性及保質(zhì)期
室溫下一個(gè)星期內(nèi)穩(wěn)定。
自收到之日起， 2~8℃避光保存，12個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
細(xì)胞凍存：
選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，保證活率大于90%。
制備細(xì)胞凍存液：45%新鮮培養(yǎng)基，45%條件培養(yǎng)基，10%DMSO。
200g離心5分鐘，棄去上清。
用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，取樣計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度；
迅速轉(zhuǎn)移重懸的細(xì)胞至無菌的凍存管中，每管1~2ml。
迅速分裝細(xì)胞至無菌的凍存管中，每管 1~2 mL，密封。
將凍存管放入程序降溫盒中，-80℃冰箱放置過夜； 如需要長期保存，在液氮罐中保存。
細(xì)胞復(fù)蘇：
迅速取出凍存的 SF9/SF21 細(xì)胞，在 27℃水浴解凍（可以在水中輕輕晃動(dòng)，時(shí)間控制在 1 min 內(nèi)）；
對(duì)凍存管表面消毒；將融化的細(xì)胞轉(zhuǎn)至無菌的含 5-10 mL新鮮培養(yǎng)基的無菌離心管中;
200 g 低速離心 5 分鐘，緩慢倒掉上部培養(yǎng)基，切勿將沉降的細(xì)胞懸起；
用 10-20 mL 新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，確保重懸后的細(xì)胞密度大于 1×106cells/mL 左右；
將重懸的細(xì)胞放入無菌培養(yǎng)瓶中，旋蓋擰松，放在搖床中懸浮培養(yǎng);
當(dāng)細(xì)胞密度生長達(dá)到 2~4×106/mL 時(shí)，可以進(jìn)行傳代，傳代時(shí)細(xì)胞接種密度為 0.8-1×106/mL。