產(chǎn)品說明:
Fura-2, AM ester 是一種比率熒光染料,可與游離細(xì)胞內(nèi)鈣結(jié)合,是比率成像顯微鏡的首選染料。Fura-2,AM酯是膜滲透性的,因此可以通過孵育加載到細(xì)胞中。由于AM酯的水溶性相對較低,因此溫和的洗滌劑Pluronic? F-127(貨號(hào)#59004)通常用作分散劑,以促進(jìn)細(xì)胞加載。Fura-2,AM酯本身不與Ca結(jié)合2+,但一旦進(jìn)入細(xì)胞,它很容易被內(nèi)源性酯酶水解為 Fura-2。
Fura-2 熒光可以使用流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡或某些熒光酶標(biāo)儀檢測。在鈣結(jié)合時(shí),指示劑的熒光激發(fā)最大值從 363 nm (Ca2+-free) 至 335 nm (Ca2+-飽和),而熒光發(fā)射最大值在~510nm處相對不變。Fura-2 的主要用途是藥物發(fā)現(xiàn),用于測量 G 蛋白偶聯(lián)受體 (GPCR) 和鈣通道激活后的細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員。
淡黃色固體,溶于DMSO
在 -20°C 下避光儲(chǔ)存,尤其是在溶液中
Kd: 145 nM (22°C in pH 7.2 緩沖液) (水解后)
λ前任/λEm(無鈣2+) = 363/512 納米;λ前任/λEm(高鈣2+) = 335/505 nm(水解后)
ε(363 nm,無鈣2+) = 27,000 米-1厘米-1;ε (335 nm, 高鈣2+) = 35,000 米-1厘米-1(水解后)
C44H47N3O24
分子量:1001.9
[108964-32-5]
基于 BAPTA 的離子指示劑(如 Fura-2)已被證明可以通過 EDC/EDAC (cat# 59002) 原位固定。指示劑染料的固定可用于下游免疫熒光和 IHC 研究 (Cell Calcium 1997, 21(3), 175)。
由于指示劑不與細(xì)胞成分共價(jià)結(jié)合,因此它可能通過有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白主動(dòng)從細(xì)胞中流出。外排速率隨溫度升高而增加,并且可能因細(xì)胞類型而異,導(dǎo)致幾分鐘到幾小時(shí)的可變保留時(shí)間。在細(xì)胞中使用指示劑的實(shí)驗(yàn)通常在上樣后一兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行,但如果需要,可以用指示劑重新加載細(xì)胞。有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑 Probenecid (#50027) 可用于減慢指示劑從細(xì)胞外排的速度。
Fura-2, AM ester 是一種比率熒光染料,可與游離細(xì)胞內(nèi)鈣結(jié)合,是比率成像顯微鏡的首選染料。Fura-2,AM酯是膜滲透性的,因此可以通過孵育加載到細(xì)胞中。由于AM酯的水溶性相對較低,因此溫和的洗滌劑Pluronic? F-127(貨號(hào)#59004)通常用作分散劑,以促進(jìn)細(xì)胞加載。Fura-2,AM酯本身不與Ca結(jié)合2+,但一旦進(jìn)入細(xì)胞,它很容易被內(nèi)源性酯酶水解為 Fura-2。
Fura-2 熒光可以使用流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡或某些熒光酶標(biāo)儀檢測。在鈣結(jié)合時(shí),指示劑的熒光激發(fā)最大值從 363 nm (Ca2+-free) 至 335 nm (Ca2+-飽和),而熒光發(fā)射最大值在~510nm處相對不變。Fura-2 的主要用途是藥物發(fā)現(xiàn),用于測量 G 蛋白偶聯(lián)受體 (GPCR) 和鈣通道激活后的細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員。
淡黃色固體,溶于DMSO
在 -20°C 下避光儲(chǔ)存,尤其是在溶液中
Kd: 145 nM (22°C in pH 7.2 緩沖液) (水解后)
λ前任/λEm(無鈣2+) = 363/512 納米;λ前任/λEm(高鈣2+) = 335/505 nm(水解后)
ε(363 nm,無鈣2+) = 27,000 米-1厘米-1;ε (335 nm, 高鈣2+) = 35,000 米-1厘米-1(水解后)
C44H47N3O24
分子量:1001.9
[108964-32-5]
基于 BAPTA 的離子指示劑(如 Fura-2)已被證明可以通過 EDC/EDAC (cat# 59002) 原位固定。指示劑染料的固定可用于下游免疫熒光和 IHC 研究 (Cell Calcium 1997, 21(3), 175)。
由于指示劑不與細(xì)胞成分共價(jià)結(jié)合,因此它可能通過有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白主動(dòng)從細(xì)胞中流出。外排速率隨溫度升高而增加,并且可能因細(xì)胞類型而異,導(dǎo)致幾分鐘到幾小時(shí)的可變保留時(shí)間。在細(xì)胞中使用指示劑的實(shí)驗(yàn)通常在上樣后一兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行,但如果需要,可以用指示劑重新加載細(xì)胞。有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑 Probenecid (#50027) 可用于減慢指示劑從細(xì)胞外排的速度。