產(chǎn)品說(shuō)明：
Diagenode標(biāo)記緩沖液（2x）是進(jìn)行任何標(biāo)記反應(yīng)的推薦試劑。它可以與DNA或染色質(zhì)樣品上的Diagenodetagmentase結(jié)合使用，作為總體積反應(yīng)的一半。這是ATAC-seq實(shí)驗(yàn)中使用的試劑。
儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存在-20°C。
預(yù)防 措施：本產(chǎn)品僅供研究使用。不適用于診斷或治療程序。
使用示例 ：Diagenode標(biāo)記緩沖區(qū)（2x）可用于執(zhí)行以下協(xié)議中的標(biāo)記步驟。
碎裂測(cè)定實(shí)驗(yàn)：
可以在λDNA上進(jìn)行片段化測(cè)定，使用以下孵育混合物進(jìn)行1次反應(yīng)：
然后將反應(yīng)物在55°C下孵育7分鐘
可以通過(guò)加入SDS溶液（0.2%最終）在室溫下孵育5分鐘來(lái)停止標(biāo)記
然后可以在瓊脂糖凝膠上分析DNA
ATAC-seq實(shí)驗(yàn)：
細(xì)胞裂解和細(xì)胞核分離后，細(xì)胞核沉淀可以與以下混合物一起孵育進(jìn)行 1 次反應(yīng)
每個(gè)反應(yīng)的細(xì)胞核數(shù)量將取決于ATAC-seq實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。使用所提出的方案在每個(gè)反應(yīng)的50，000個(gè)細(xì)胞核上成功標(biāo)記。
然后將反應(yīng)物在37°C下孵育30分鐘。
然后可以通過(guò)從Diagenode MicroChIP透視柱（貨號(hào)C03040001）中加入250μlDNA結(jié)合緩沖液來(lái)停止標(biāo)記反應(yīng)。
然后可以使用MicroChIP透視柱（貨號(hào)C03040001）純化標(biāo)記文庫(kù)，并進(jìn)行擴(kuò)增
Diagenode標(biāo)記緩沖液（2x）是進(jìn)行任何標(biāo)記反應(yīng)的推薦試劑。它可以與DNA或染色質(zhì)樣品上的Diagenodetagmentase結(jié)合使用，作為總體積反應(yīng)的一半。這是ATAC-seq實(shí)驗(yàn)中使用的試劑。
儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存在-20°C。
預(yù)防 措施：本產(chǎn)品僅供研究使用。不適用于診斷或治療程序。
使用示例 ：Diagenode標(biāo)記緩沖區(qū)（2x）可用于執(zhí)行以下協(xié)議中的標(biāo)記步驟。
碎裂測(cè)定實(shí)驗(yàn)：
可以在λDNA上進(jìn)行片段化測(cè)定，使用以下孵育混合物進(jìn)行1次反應(yīng)：
| 標(biāo)記緩沖區(qū)（2個(gè)） | 10μl |
| λDNA（50納克/μl） | 2μl |
| 標(biāo)記酶負(fù)載 | 1μl |
| 不含核酸酶的水 | 7μl |
可以通過(guò)加入SDS溶液（0.2%最終）在室溫下孵育5分鐘來(lái)停止標(biāo)記
然后可以在瓊脂糖凝膠上分析DNA
ATAC-seq實(shí)驗(yàn)：
細(xì)胞裂解和細(xì)胞核分離后，細(xì)胞核沉淀可以與以下混合物一起孵育進(jìn)行 1 次反應(yīng)
| 標(biāo)記緩沖區(qū)（2個(gè)） | 25 μl |
| 已加載標(biāo)記酶 | 2.5 μl |
| Digitonin 1% | 0.5 μl |
| Tween20 10% | 0.5 μl |
| PBS | 16.5 μl |
| 不含核酸酶的水 | 5 μl |
| Nuclei顆粒* |
然后將反應(yīng)物在37°C下孵育30分鐘。
然后可以通過(guò)從Diagenode MicroChIP透視柱（貨號(hào)C03040001）中加入250μlDNA結(jié)合緩沖液來(lái)停止標(biāo)記反應(yīng)。
然后可以使用MicroChIP透視柱（貨號(hào)C03040001）純化標(biāo)記文庫(kù)，并進(jìn)行擴(kuò)增
