產(chǎn)品說明:
一般描述
膠原酶是一種蛋白酶,可切割三螺旋結(jié)構(gòu)的蛋白,即膠原蛋白。溶組織梭菌 產(chǎn)生六種類型的膠原酶,即α、β、γ、δ、ε和λ。這些膠原酶對(duì)結(jié)締組織具有活性,并且對(duì)明膠的反應(yīng)性高于膠原。來自溶組織梭菌( Clostridium histolyticum )的膠原酶具有非常強(qiáng)的活性,它在低至4-10°C的溫度下可從兩端消化膠原蛋白。
特異性
膠原酶可降解天然膠原蛋白。梭菌蛋白酶,一種yi蛋白酶樣酶,以及中性蛋白酶也會(huì)降解其他蛋白質(zhì)。
酶活性:
膠原酶活性:>0.15U/mg(根據(jù)Wünsch)(+ 25℃,4-苯基-偶氮芐-氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染酶活性:yi蛋白酶、梭菌蛋白酶和中性蛋bai水解酶活性
膠原酶A具有平衡的酶活性比例。
應(yīng)用
來自溶組織梭菌( Clostridium histolyticum )的膠原酶被廣泛用于許多組織類型(例如,肺、心臟、肌肉、骨骼、脂肪組織、肝臟、腎臟、軟骨、乳腺、胎盤、血管、腦、腫瘤和臍帶等)的解離,并用于制備單細(xì)胞懸浮液以便建立原代細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。當(dāng)產(chǎn)量、活力和功能性很重要時(shí),推薦使用膠原酶A。
Roche公司的梭菌 原酶已被用于制備來自多種組織的細(xì)胞,如肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、胰島細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞 等。但是,應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定各批次的酶是否適用于特定組織的解離。
單位定義
內(nèi)容物
凍干粉,非無菌
單位定義:來自Roche的膠原酶以W??nsch單位表示(在+25°C 下,每分鐘使用W??nsch底物生成1 μmol產(chǎn)物)。
通常,膠原酶活性以Mandl單位表示(在+37°C下,在5小時(shí)內(nèi)從膠原中釋放1 μmol亮an酸)。
遺憾的是,兩種活性單位之間沒有一致的換算因數(shù),因?yàn)镸andl單位部分取決于膠原酶制劑中污染蛋白酶的濃度,而這是一個(gè)不確定變量。實(shí)際上,高純度膠原酶制劑的Mandl單位比酶活要低于粗制膠原酶制劑。梭菌 制劑的換算因數(shù)通常約為1:1800(例如 ,指定批次的 梭菌 膠原酶含有約0.15 W??nsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
制備說明
激活劑:Ca2+
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA,EGTA,Cys,His,DTT
血清不抑制膠原酶。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
Yi蛋白酶抑制劑:抑tai酶、yi蛋白酶抑制劑(蛋清、大豆)、血清
工作濃度:0.5至2.5 mg/ml
儲(chǔ)存條件(工作溶液):-15至-25 °C
羅氏建議僅重新配立即使用所需的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一周。因?yàn)橹匦屡渲坪蠡钚越档土耍砸苊夥磸?fù)凍融。
重懸
可重懸于任意平衡yan溶液(如,HBSS)
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不適用于診斷程序。
一般描述
膠原酶是一種蛋白酶,可切割三螺旋結(jié)構(gòu)的蛋白,即膠原蛋白。溶組織梭菌 產(chǎn)生六種類型的膠原酶,即α、β、γ、δ、ε和λ。這些膠原酶對(duì)結(jié)締組織具有活性,并且對(duì)明膠的反應(yīng)性高于膠原。來自溶組織梭菌( Clostridium histolyticum )的膠原酶具有非常強(qiáng)的活性,它在低至4-10°C的溫度下可從兩端消化膠原蛋白。
特異性
膠原酶可降解天然膠原蛋白。梭菌蛋白酶,一種yi蛋白酶樣酶,以及中性蛋白酶也會(huì)降解其他蛋白質(zhì)。
酶活性:
膠原酶活性:>0.15U/mg(根據(jù)Wünsch)(+ 25℃,4-苯基-偶氮芐-氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染酶活性:yi蛋白酶、梭菌蛋白酶和中性蛋bai水解酶活性
膠原酶A具有平衡的酶活性比例。
應(yīng)用
來自溶組織梭菌( Clostridium histolyticum )的膠原酶被廣泛用于許多組織類型(例如,肺、心臟、肌肉、骨骼、脂肪組織、肝臟、腎臟、軟骨、乳腺、胎盤、血管、腦、腫瘤和臍帶等)的解離,并用于制備單細(xì)胞懸浮液以便建立原代細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。當(dāng)產(chǎn)量、活力和功能性很重要時(shí),推薦使用膠原酶A。
Roche公司的梭菌 原酶已被用于制備來自多種組織的細(xì)胞,如肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、胰島細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞 等。但是,應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定各批次的酶是否適用于特定組織的解離。
單位定義
內(nèi)容物
凍干粉,非無菌
單位定義:來自Roche的膠原酶以W??nsch單位表示(在+25°C 下,每分鐘使用W??nsch底物生成1 μmol產(chǎn)物)。
通常,膠原酶活性以Mandl單位表示(在+37°C下,在5小時(shí)內(nèi)從膠原中釋放1 μmol亮an酸)。
遺憾的是,兩種活性單位之間沒有一致的換算因數(shù),因?yàn)镸andl單位部分取決于膠原酶制劑中污染蛋白酶的濃度,而這是一個(gè)不確定變量。實(shí)際上,高純度膠原酶制劑的Mandl單位比酶活要低于粗制膠原酶制劑。梭菌 制劑的換算因數(shù)通常約為1:1800(例如 ,指定批次的 梭菌 膠原酶含有約0.15 W??nsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
制備說明
激活劑:Ca2+
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA,EGTA,Cys,His,DTT
血清不抑制膠原酶。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
Yi蛋白酶抑制劑:抑tai酶、yi蛋白酶抑制劑(蛋清、大豆)、血清
工作濃度:0.5至2.5 mg/ml
儲(chǔ)存條件(工作溶液):-15至-25 °C
羅氏建議僅重新配立即使用所需的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一周。因?yàn)橹匦屡渲坪蠡钚越档土耍砸苊夥磸?fù)凍融。
重懸
可重懸于任意平衡yan溶液(如,HBSS)
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不適用于診斷程序。



