產(chǎn)品說明：
說明
一般描述
檢測時(shí)間：145分鐘
樣品材料
線性化質(zhì)粒DNA
PCR產(chǎn)物
原理
DIG RNA標(biāo)記試劑盒可產(chǎn)生已知長度的DIG標(biāo)記單鏈RNA 探針。SP6或T7 RNA聚合酶都可在體外對來自模板DNA（在地高辛-UTP存在情況下）對這些探針進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。
RNA標(biāo)記通過體外轉(zhuǎn)錄完成
待轉(zhuǎn)錄的DNA被克隆至含有SP6及T7 RNA聚合酶的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)（如pSPT 18或19）。相鄰的模板DNA在合適的位點(diǎn)進(jìn)行線性化而RNA聚合酶用于生成“流失的”轉(zhuǎn)錄本。DIG-UTP被插入至轉(zhuǎn)錄本中。新合成RNA的每個(gè)第20至25個(gè)核苷酸都是DIG-UTP。由于核苷酸的濃度在標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中并不會(huì)成為限制，該反應(yīng)可生成大量的標(biāo)記RNA。
我們致力于為您提供更環(huán)保的替代產(chǎn)品，以符合“綠色化學(xué)的12項(xiàng)原則”的一項(xiàng)或多項(xiàng)原則要求。該產(chǎn)品為一種安全的化學(xué)品。 DIG系統(tǒng)是靈敏且具有成本效益的方案，可替代放射性標(biāo)記和放射法檢測核酸。有許多已發(fā)表論文證明了DIG系統(tǒng)的通用性，因此，使用放射性標(biāo)記不再是標(biāo)記用于雜交的DNA的唯一選擇。
試劑盒用于通過SP6和T7聚合酶進(jìn)行的體外轉(zhuǎn)錄而實(shí)現(xiàn)基于地高辛-UTP的RNA標(biāo)記。通過這種方法，已知長度的單鏈RNA探針被生成，而這可用于多種雜交技術(shù)中。
特異性
靈敏度及特異性
DIG標(biāo)記的RNA探針可在最低至1 μg的哺乳動(dòng)物DNA中按照以下的檢測條件進(jìn)行單拷貝基因的檢測：該雜交混合液包含20至100 ng標(biāo)記探針/ml，而結(jié)合的探針可通過抗DIG-AP進(jìn)行檢測并通過化學(xué)發(fā)光底物CDP-Star進(jìn)行可視化。
熱滅活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 終止反應(yīng)。
應(yīng)用
用于利用SP6及T7 DNA聚合酶通過體外轉(zhuǎn)錄而使用DIG-11-UTP進(jìn)行RNA標(biāo)記。DIG標(biāo)記的“流失”轉(zhuǎn)錄本是以高效率進(jìn)行合成的，并用于多種雜交技術(shù)：
Northern blots[1]
Southern blots
原位雜交[2][3][4]
菌斑或克隆提升
RNase保護(hù)試驗(yàn)
由于高度特異性和敏感的檢測系統(tǒng)，DIG標(biāo)記的探針可用于1μg 總?cè)祟怐NA中單拷貝基因的檢測。
注意：由于DIG和UTP之間的連接對于堿具有抗性，DIG標(biāo)記的RNA可通過堿處理進(jìn)行片段化。略微降低DIG標(biāo)記的RNA探針的大小可能會(huì)使其更為適合于原位雜交中的特定應(yīng)用。
包裝
1個(gè)試劑盒包含12種組分。
質(zhì)量
檢測原理：待轉(zhuǎn)錄的DNA模板將會(huì)被克隆至含有SP6及（或）T7 RNA聚合酶啟動(dòng)子的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。當(dāng)在合適位點(diǎn)進(jìn)行線性化后，RNA在DIG-UTP的存在下進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，來自1μg 模板的約10μg的全長DIG標(biāo)記RNA被轉(zhuǎn)錄。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。
說明
一般描述
檢測時(shí)間：145分鐘
樣品材料
線性化質(zhì)粒DNA
PCR產(chǎn)物
原理
DIG RNA標(biāo)記試劑盒可產(chǎn)生已知長度的DIG標(biāo)記單鏈RNA 探針。SP6或T7 RNA聚合酶都可在體外對來自模板DNA（在地高辛-UTP存在情況下）對這些探針進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。
RNA標(biāo)記通過體外轉(zhuǎn)錄完成
待轉(zhuǎn)錄的DNA被克隆至含有SP6及T7 RNA聚合酶的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)（如pSPT 18或19）。相鄰的模板DNA在合適的位點(diǎn)進(jìn)行線性化而RNA聚合酶用于生成“流失的”轉(zhuǎn)錄本。DIG-UTP被插入至轉(zhuǎn)錄本中。新合成RNA的每個(gè)第20至25個(gè)核苷酸都是DIG-UTP。由于核苷酸的濃度在標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中并不會(huì)成為限制，該反應(yīng)可生成大量的標(biāo)記RNA。
我們致力于為您提供更環(huán)保的替代產(chǎn)品，以符合“綠色化學(xué)的12項(xiàng)原則”的一項(xiàng)或多項(xiàng)原則要求。該產(chǎn)品為一種安全的化學(xué)品。 DIG系統(tǒng)是靈敏且具有成本效益的方案，可替代放射性標(biāo)記和放射法檢測核酸。有許多已發(fā)表論文證明了DIG系統(tǒng)的通用性，因此，使用放射性標(biāo)記不再是標(biāo)記用于雜交的DNA的唯一選擇。
試劑盒用于通過SP6和T7聚合酶進(jìn)行的體外轉(zhuǎn)錄而實(shí)現(xiàn)基于地高辛-UTP的RNA標(biāo)記。通過這種方法，已知長度的單鏈RNA探針被生成，而這可用于多種雜交技術(shù)中。
特異性
靈敏度及特異性
DIG標(biāo)記的RNA探針可在最低至1 μg的哺乳動(dòng)物DNA中按照以下的檢測條件進(jìn)行單拷貝基因的檢測：該雜交混合液包含20至100 ng標(biāo)記探針/ml，而結(jié)合的探針可通過抗DIG-AP進(jìn)行檢測并通過化學(xué)發(fā)光底物CDP-Star進(jìn)行可視化。
熱滅活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 終止反應(yīng)。
應(yīng)用
用于利用SP6及T7 DNA聚合酶通過體外轉(zhuǎn)錄而使用DIG-11-UTP進(jìn)行RNA標(biāo)記。DIG標(biāo)記的“流失”轉(zhuǎn)錄本是以高效率進(jìn)行合成的，并用于多種雜交技術(shù)：
Northern blots[1]
Southern blots
原位雜交[2][3][4]
菌斑或克隆提升
RNase保護(hù)試驗(yàn)
由于高度特異性和敏感的檢測系統(tǒng)，DIG標(biāo)記的探針可用于1μg 總?cè)祟怐NA中單拷貝基因的檢測。
注意：由于DIG和UTP之間的連接對于堿具有抗性，DIG標(biāo)記的RNA可通過堿處理進(jìn)行片段化。略微降低DIG標(biāo)記的RNA探針的大小可能會(huì)使其更為適合于原位雜交中的特定應(yīng)用。
包裝
1個(gè)試劑盒包含12種組分。
質(zhì)量
檢測原理：待轉(zhuǎn)錄的DNA模板將會(huì)被克隆至含有SP6及（或）T7 RNA聚合酶啟動(dòng)子的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。當(dāng)在合適位點(diǎn)進(jìn)行線性化后，RNA在DIG-UTP的存在下進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，來自1μg 模板的約10μg的全長DIG標(biāo)記RNA被轉(zhuǎn)錄。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。