產(chǎn)品說明：
說明
一般描述
標(biāo)記效率：來自1μg 線性模板DNA的約10μg的全長地高辛標(biāo)記RNA被轉(zhuǎn)錄。
檢測時間：135分鐘
樣本材料
線性化質(zhì)粒DNA：
待轉(zhuǎn)錄的DNA將會被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶啟動子并相鄰于多接頭的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。對于“流失”轉(zhuǎn)錄本的合成，質(zhì)粒是通過限制性酶進(jìn)行線性化的。限制性酶生成的5′-突出應(yīng)當(dāng)被使用；3′ 突出應(yīng)當(dāng)被避免。線性化的模板DNA應(yīng)當(dāng)通過酚氯仿抽提及乙醇沉淀進(jìn)行純化，以避免RNase的污染。對于′run around′轉(zhuǎn)錄環(huán)狀質(zhì)粒DNA會被使用。
PCR產(chǎn)物：
含有RNA聚合酶啟動子序列的PCR片段也可被用作轉(zhuǎn)錄的模板。推薦在轉(zhuǎn)錄之前對PCR片段使用HIghPure柱進(jìn)行純化。
通過這種方法，特定長度的DIG標(biāo)記單鏈RNA探針通過體外轉(zhuǎn)錄被生成。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，DIG-11-UTP通過SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大約每20到25個核苷酸的間隔插入轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中。DIG RNA標(biāo)記混合物專門設(shè)計用于優(yōu)化轉(zhuǎn)錄緩沖液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA標(biāo)記
內(nèi)含物
10x 溶液帶有：10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
特異性
熱滅活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 終止反應(yīng)。
應(yīng)用
利用SP6，T7及T3 RNA聚合酶通過體外轉(zhuǎn)錄而使用地高辛-11-UTP進(jìn)行RNA標(biāo)記。DIG標(biāo)記RNA已用于多種雜交技術(shù)：
Northern blots[1]
Southern blots
斑點(diǎn)印跡
菌斑或克隆提升
RNase保護(hù)實驗
染色體, 細(xì)胞, 及組織切片原位[2][3]
特點(diǎn)和優(yōu)勢
DIG RNA標(biāo)記混合物專門設(shè)計用于來自Roche并配以優(yōu)化的轉(zhuǎn)錄緩沖液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
質(zhì)量
經(jīng)DIG RNA標(biāo)記試劑盒和DIG核酸檢測試劑盒檢測的功能。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。
說明
一般描述
標(biāo)記效率：來自1μg 線性模板DNA的約10μg的全長地高辛標(biāo)記RNA被轉(zhuǎn)錄。
檢測時間：135分鐘
樣本材料
線性化質(zhì)粒DNA：
待轉(zhuǎn)錄的DNA將會被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶啟動子并相鄰于多接頭的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。對于“流失”轉(zhuǎn)錄本的合成，質(zhì)粒是通過限制性酶進(jìn)行線性化的。限制性酶生成的5′-突出應(yīng)當(dāng)被使用；3′ 突出應(yīng)當(dāng)被避免。線性化的模板DNA應(yīng)當(dāng)通過酚氯仿抽提及乙醇沉淀進(jìn)行純化，以避免RNase的污染。對于′run around′轉(zhuǎn)錄環(huán)狀質(zhì)粒DNA會被使用。
PCR產(chǎn)物：
含有RNA聚合酶啟動子序列的PCR片段也可被用作轉(zhuǎn)錄的模板。推薦在轉(zhuǎn)錄之前對PCR片段使用HIghPure柱進(jìn)行純化。
通過這種方法，特定長度的DIG標(biāo)記單鏈RNA探針通過體外轉(zhuǎn)錄被生成。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，DIG-11-UTP通過SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大約每20到25個核苷酸的間隔插入轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中。DIG RNA標(biāo)記混合物專門設(shè)計用于優(yōu)化轉(zhuǎn)錄緩沖液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA標(biāo)記
內(nèi)含物
10x 溶液帶有：10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
特異性
熱滅活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 終止反應(yīng)。
應(yīng)用
利用SP6，T7及T3 RNA聚合酶通過體外轉(zhuǎn)錄而使用地高辛-11-UTP進(jìn)行RNA標(biāo)記。DIG標(biāo)記RNA已用于多種雜交技術(shù)：
Northern blots[1]
Southern blots
斑點(diǎn)印跡
菌斑或克隆提升
RNase保護(hù)實驗
染色體, 細(xì)胞, 及組織切片原位[2][3]
特點(diǎn)和優(yōu)勢
DIG RNA標(biāo)記混合物專門設(shè)計用于來自Roche并配以優(yōu)化的轉(zhuǎn)錄緩沖液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
質(zhì)量
經(jīng)DIG RNA標(biāo)記試劑盒和DIG核酸檢測試劑盒檢測的功能。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。