產(chǎn)品說明：
說明
一般描述
用于生wu素-16-UTP標(biāo)記RNA的便捷核苷酸混合物。
特異性
熱滅活：添加2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)以終止反應(yīng)。
應(yīng)用
生wu素RNA標(biāo)記混合物已用于通過生wu素-16-UTP與SP6、T7和T3 RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄的RNA標(biāo)記。[1][2]
生wu素標(biāo)記RNA還應(yīng)用于一系列雜交技術(shù)：
DNA印跡
RNA印跡[3]
斑點(diǎn)印跡
菌落及菌斑清除
RNA酶保護(hù)試驗(yàn)
原位雜交[4]
微陣列雜交
RNA pull down試驗(yàn)[1]
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
組份
10x 濃縮液包含: ATP、CTP、GTP各10mM，6.5mM UTP，3.5mM生wu素-16-UTP，pH 7.5
質(zhì)量
結(jié)合DIG RNA標(biāo)記試劑盒進(jìn)行了功能檢測(cè)。
原理
生wu素標(biāo)記的、確定長(zhǎng)度的單鏈RNA探針通過體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生。生wu素-16-UTP通過SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大約每20到25個(gè)核苷酸的間隔插入轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，轉(zhuǎn)錄條件如下所述。生wu素RNA標(biāo)記混合物專為Roche SP6、T7和T3 RNA聚合酶設(shè)計(jì)，隨附優(yōu)化的轉(zhuǎn)錄緩沖液。
制備說明
試驗(yàn)時(shí)間：135分鐘
樣品材料
線性化質(zhì)粒DNA：待轉(zhuǎn)錄的DNA將會(huì)被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶啟動(dòng)子并相鄰于多接頭的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。對(duì)于′流失′轉(zhuǎn)錄本的合成，質(zhì)粒是通過限制性酶進(jìn)行線性化的。應(yīng)使用限制性酶生成的5′-突出；應(yīng)避免3′突出。線性化模板DNA應(yīng)采用酚氯仿萃取和乙醇沉淀法純化，以避免RNase污染。為′完成′轉(zhuǎn)錄，使用了環(huán)狀質(zhì)粒DNA
PCR產(chǎn)物：含有RNA聚合酶啟動(dòng)子序列的PCR片段，也可以作為轉(zhuǎn)錄模板。推薦在轉(zhuǎn)錄前通過凝膠電泳純化正確的PCR片段。
標(biāo)記效率：μ通過1μg線性模板DNA和RNA聚合酶進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記反應(yīng)，產(chǎn)生大約10μg全長(zhǎng)生wu素標(biāo)記RNA。在斑點(diǎn)試驗(yàn)中，聯(lián)用抗生wu素-AP與化學(xué)發(fā)光底物CSPD可檢測(cè)低至0.3pg的生wu素標(biāo)記RNA。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。
說明
一般描述
用于生wu素-16-UTP標(biāo)記RNA的便捷核苷酸混合物。
特異性
熱滅活：添加2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)以終止反應(yīng)。
應(yīng)用
生wu素RNA標(biāo)記混合物已用于通過生wu素-16-UTP與SP6、T7和T3 RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄的RNA標(biāo)記。[1][2]
生wu素標(biāo)記RNA還應(yīng)用于一系列雜交技術(shù)：
DNA印跡
RNA印跡[3]
斑點(diǎn)印跡
菌落及菌斑清除
RNA酶保護(hù)試驗(yàn)
原位雜交[4]
微陣列雜交
RNA pull down試驗(yàn)[1]
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
組份
10x 濃縮液包含: ATP、CTP、GTP各10mM，6.5mM UTP，3.5mM生wu素-16-UTP，pH 7.5
質(zhì)量
結(jié)合DIG RNA標(biāo)記試劑盒進(jìn)行了功能檢測(cè)。
原理
生wu素標(biāo)記的、確定長(zhǎng)度的單鏈RNA探針通過體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生。生wu素-16-UTP通過SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大約每20到25個(gè)核苷酸的間隔插入轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，轉(zhuǎn)錄條件如下所述。生wu素RNA標(biāo)記混合物專為Roche SP6、T7和T3 RNA聚合酶設(shè)計(jì)，隨附優(yōu)化的轉(zhuǎn)錄緩沖液。
制備說明
試驗(yàn)時(shí)間：135分鐘
樣品材料
線性化質(zhì)粒DNA：待轉(zhuǎn)錄的DNA將會(huì)被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶啟動(dòng)子并相鄰于多接頭的合適轉(zhuǎn)錄載體的多接頭位點(diǎn)。對(duì)于′流失′轉(zhuǎn)錄本的合成，質(zhì)粒是通過限制性酶進(jìn)行線性化的。應(yīng)使用限制性酶生成的5′-突出；應(yīng)避免3′突出。線性化模板DNA應(yīng)采用酚氯仿萃取和乙醇沉淀法純化，以避免RNase污染。為′完成′轉(zhuǎn)錄，使用了環(huán)狀質(zhì)粒DNA
PCR產(chǎn)物：含有RNA聚合酶啟動(dòng)子序列的PCR片段，也可以作為轉(zhuǎn)錄模板。推薦在轉(zhuǎn)錄前通過凝膠電泳純化正確的PCR片段。
標(biāo)記效率：μ通過1μg線性模板DNA和RNA聚合酶進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記反應(yīng)，產(chǎn)生大約10μg全長(zhǎng)生wu素標(biāo)記RNA。在斑點(diǎn)試驗(yàn)中，聯(lián)用抗生wu素-AP與化學(xué)發(fā)光底物CSPD可檢測(cè)低至0.3pg的生wu素標(biāo)記RNA。
其他說明
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。