產(chǎn)品說明：
一般描述
用于大規(guī)模（maxi）制備質(zhì)粒DNA。
應(yīng)用
Genopure質(zhì)粒大提試劑盒可用于從細(xì)菌培養(yǎng)物中大量制備轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA（*多500μg質(zhì)粒）。分離得到的質(zhì)粒適用于大多數(shù)分子生物學(xué)應(yīng)用：
轉(zhuǎn)染
Southern印跡
測序
PCR/長片段PCR
限制性酶切消化
克隆
特點(diǎn)和優(yōu)勢
Genopure質(zhì)粒大提試劑盒使用改良的堿性裂解法，可大量制備高chun度的質(zhì)粒DNA。
使用即用型試劑，節(jié)省時間。
較多可純化10個樣品（10分鐘手動操作/總共75分鐘）。
可純化所有大小和類型的質(zhì)粒
甚至是BAC DNA，因?yàn)榭梢赃^濾粗裂解物以避免質(zhì)粒剪切。
可并行處理多個樣本
使用高速重力流動柱。
無需使用有害的有機(jī)化合物
如氯hua銫、ben酚、lu仿和溴hua乙錠。
所得質(zhì)粒DNA的純度高于
通過2×氯hua銫梯度離心制備的質(zhì)粒。
組分
懸浮緩沖液
RNase A
裂解緩沖液
中和緩沖液
平衡緩沖液
洗滌緩沖液
洗脫緩沖液
NucleoBond AX 500色譜柱
折疊式過濾器（直徑240 mm）
密封圈
質(zhì)量：
已對使用該試劑盒純化得到的質(zhì)粒DNA進(jìn)行了限制性酶切消化測試；根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案所述方法從轉(zhuǎn)化HB101中分離得到pUC 19。如瓊脂糖凝膠分析所示，在+ 37℃下使用1單位Msp I將1μg質(zhì)粒wan全酶解2小時。
用250μg純化質(zhì)粒測試質(zhì)?；厥章省３菪问酱笥?0%時，回收率高于90％。通過從DH5a細(xì)胞中分離pBS，確定質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量。從A600密度為3-6的150ml培養(yǎng)物中，獲得超過400μg的質(zhì)粒DNA。
純度（利用A260/A280比率進(jìn)行檢測）為1.8±0.2。
利用通過標(biāo)準(zhǔn)方法純化并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測的3 μg pBS分析RNA污染。結(jié)果未檢測到RNA。
已經(jīng)根據(jù)當(dāng)前的質(zhì)量控制流程，檢測發(fā)現(xiàn)試劑盒組分不含核酸酶。
制備說明
分離流程基于改良的堿性裂解法，可分為以下步驟：細(xì)菌被部分裂解，使質(zhì)粒DNA透過細(xì)胞壁進(jìn)入上清液。較大的大腸桿菌染色體DNA被困在細(xì)胞壁中。通過過濾或離心，除去裂解物中的細(xì)胞碎片，并將含有質(zhì)粒DNA的組分上樣到預(yù)平衡柱上。由于凈化的裂解物溶于低鹽緩沖液后再上樣到柱上，使得質(zhì)粒DNA與柱中的大孔陰離子交換材料結(jié)合。用高鹽洗滌液從柱上洗脫細(xì)胞雜質(zhì)。 *后一步，從柱上洗脫質(zhì)粒DNA。將回收的DNA從洗脫液中沉淀出來，以除去鹽并濃縮質(zhì)粒。
分析說明
樣品：
含有高拷貝數(shù)質(zhì)粒的大腸桿菌培養(yǎng)物：30至150mL細(xì)菌培養(yǎng)物
含有低拷貝數(shù)質(zhì)粒的大腸桿菌培養(yǎng)物：100至500mL細(xì)菌培養(yǎng)物
質(zhì)粒大小：分離流程適用于所有大小的質(zhì)粒。注意：較大構(gòu)建體（高達(dá)100 kb）的裂解液應(yīng)通過過濾而不是離心來凈化，以避免剪切質(zhì)粒。
所需時間：75分鐘（包括過濾裂解液）
一般產(chǎn)量：
高拷貝數(shù)質(zhì)粒：3至5 μg/mL培養(yǎng)物
低拷貝數(shù)質(zhì)粒：0.2至1 μg/mL培養(yǎng)物
產(chǎn)物純度：分離的質(zhì)粒DNA不含其他細(xì)菌成分，包括RNA。
其他說明
離子交換色譜
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。
一般描述
用于大規(guī)模（maxi）制備質(zhì)粒DNA。
應(yīng)用
Genopure質(zhì)粒大提試劑盒可用于從細(xì)菌培養(yǎng)物中大量制備轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA（*多500μg質(zhì)粒）。分離得到的質(zhì)粒適用于大多數(shù)分子生物學(xué)應(yīng)用：
轉(zhuǎn)染
Southern印跡
測序
PCR/長片段PCR
限制性酶切消化
克隆
特點(diǎn)和優(yōu)勢
Genopure質(zhì)粒大提試劑盒使用改良的堿性裂解法，可大量制備高chun度的質(zhì)粒DNA。
使用即用型試劑，節(jié)省時間。
較多可純化10個樣品（10分鐘手動操作/總共75分鐘）。
可純化所有大小和類型的質(zhì)粒
甚至是BAC DNA，因?yàn)榭梢赃^濾粗裂解物以避免質(zhì)粒剪切。
可并行處理多個樣本
使用高速重力流動柱。
無需使用有害的有機(jī)化合物
如氯hua銫、ben酚、lu仿和溴hua乙錠。
所得質(zhì)粒DNA的純度高于
通過2×氯hua銫梯度離心制備的質(zhì)粒。
組分
懸浮緩沖液
RNase A
裂解緩沖液
中和緩沖液
平衡緩沖液
洗滌緩沖液
洗脫緩沖液
NucleoBond AX 500色譜柱
折疊式過濾器（直徑240 mm）
密封圈
質(zhì)量：
已對使用該試劑盒純化得到的質(zhì)粒DNA進(jìn)行了限制性酶切消化測試；根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案所述方法從轉(zhuǎn)化HB101中分離得到pUC 19。如瓊脂糖凝膠分析所示，在+ 37℃下使用1單位Msp I將1μg質(zhì)粒wan全酶解2小時。
用250μg純化質(zhì)粒測試質(zhì)?；厥章省３菪问酱笥?0%時，回收率高于90％。通過從DH5a細(xì)胞中分離pBS，確定質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量。從A600密度為3-6的150ml培養(yǎng)物中，獲得超過400μg的質(zhì)粒DNA。
純度（利用A260/A280比率進(jìn)行檢測）為1.8±0.2。
利用通過標(biāo)準(zhǔn)方法純化并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測的3 μg pBS分析RNA污染。結(jié)果未檢測到RNA。
已經(jīng)根據(jù)當(dāng)前的質(zhì)量控制流程，檢測發(fā)現(xiàn)試劑盒組分不含核酸酶。
制備說明
分離流程基于改良的堿性裂解法，可分為以下步驟：細(xì)菌被部分裂解，使質(zhì)粒DNA透過細(xì)胞壁進(jìn)入上清液。較大的大腸桿菌染色體DNA被困在細(xì)胞壁中。通過過濾或離心，除去裂解物中的細(xì)胞碎片，并將含有質(zhì)粒DNA的組分上樣到預(yù)平衡柱上。由于凈化的裂解物溶于低鹽緩沖液后再上樣到柱上，使得質(zhì)粒DNA與柱中的大孔陰離子交換材料結(jié)合。用高鹽洗滌液從柱上洗脫細(xì)胞雜質(zhì)。 *后一步，從柱上洗脫質(zhì)粒DNA。將回收的DNA從洗脫液中沉淀出來，以除去鹽并濃縮質(zhì)粒。
分析說明
樣品：
含有高拷貝數(shù)質(zhì)粒的大腸桿菌培養(yǎng)物：30至150mL細(xì)菌培養(yǎng)物
含有低拷貝數(shù)質(zhì)粒的大腸桿菌培養(yǎng)物：100至500mL細(xì)菌培養(yǎng)物
質(zhì)粒大小：分離流程適用于所有大小的質(zhì)粒。注意：較大構(gòu)建體（高達(dá)100 kb）的裂解液應(yīng)通過過濾而不是離心來凈化，以避免剪切質(zhì)粒。
所需時間：75分鐘（包括過濾裂解液）
一般產(chǎn)量：
高拷貝數(shù)質(zhì)粒：3至5 μg/mL培養(yǎng)物
低拷貝數(shù)質(zhì)粒：0.2至1 μg/mL培養(yǎng)物
產(chǎn)物純度：分離的質(zhì)粒DNA不含其他細(xì)菌成分，包括RNA。
其他說明
離子交換色譜
僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。