Collagenase, Type 1 Source: Clostridium histolyticum
產(chǎn)品貨號：LS004194
產(chǎn)品名稱：Collagenase, Type 1 Source: Clostridium histolyticum
產(chǎn)品規(guī)格：100 mg
產(chǎn)品簡介：
粗膠原酶制劑包含兩種不同膠原酶的幾種亞型，一種巰基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨肽酶。膠原溶解和蛋白水解活性的這種組合可有效分解細(xì)胞間基質(zhì)，這是組織解離的重要組成部分。該復(fù)合物的一種成分是一種水解酶，它優(yōu)先降解天然膠原蛋白中 Y-Gly 鍵處的 Pro-Y-Gly-Pro 序列中的螺旋區(qū)域，其中 Y 通常是中性氨基酸。這種切割產(chǎn)生的產(chǎn)物容易受到進(jìn)一步的肽酶消化。粗膠原酶被半胱氨酸、EDTA 或鄰菲咯啉等金屬螯合劑抑制，但不受 DFP 抑制。它還被 α2-巨球蛋白（一種大血漿糖蛋白）抑制。Ca2+ 是酶活性所必需的。每種膠原酶的特定酶譜與獲得研究細(xì)胞的組織（或細(xì)胞的用途）相關(guān)，并且由于相關(guān)性，Worthington 已經(jīng)建立了幾種類型的粗膠原酶：1、2、3 和 4 型。
? 1 型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
? 2 型含有較高水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。
? 3 型含有最低水平的次級蛋白酶。
? 4 型的胰蛋白酶活性特別低，以限制對膜蛋白和受體的損傷。
? 5 型含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。
? 6 型含有高膠原酶活性，酪蛋白酶與膠原酶的比例為 ~2：1。相對于 I 型 （col G），設(shè)計(jì)用于富集 II 型 （col H） 膠原酶。
? 7 型膠原酶和酪蛋白酶的活性比 1 型和 2 型膠原酶高四倍。
? 純化的膠原酶（代碼：CLSPA）含有極少的次級蛋白水解活性和高膠原酶活性。
新增功能！ 無動物源型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2 膠原酶來源于在完全不含動物源性成分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物，專為必須防止引入潛在動物源性病原體的生物加工應(yīng)用而設(shè)計(jì)。次級蛋白酶的水平與 1 型和 2 型膠原酶相似。
CLSAFA 是原始的 AFA 等級，旨在具有類似于 1 型和 2 型膠原酶的膠原酶和次級蛋白酶。
CLSAFB 含有比 CLSAFA 更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。
CLSAFC 具有特別低的胰蛋白酶活性，類似于 4 型膠原酶。
CLSAFD 的比活性比 CLSAFA 高 2 到 3 倍
純化的膠原酶，代碼 CLSAFP 含有最少的次生蛋白水解活性和高膠原酶活性。
STZ1 & STZ2,0.22μ過濾的STEMxyme? AOF膠原酶/中性蛋白酶（Dispase?）混合物，用于初級和干細(xì)胞分離。
Worthington 還提供每種類型的預(yù)包裝 0.22 μm 過濾制劑，用于直接重構(gòu)和用于細(xì)胞分離和培養(yǎng)程序。酶類型與不同組織的有效性之間的相關(guān)性一直很好，但并不完美，部分原因是使用參數(shù)的可變。然而，大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是一項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。Worthington 膠原酶和污染物檢測的詳細(xì)說明可在 Worthington 酶手冊中找到。此外，組織特異性參考文獻(xiàn)和詳細(xì)的分離條件可在 Worthington 組織解離指南中找到。
膠原酶測定是 Mandl 的改良，其中膠原酶與天然膠原蛋白一起孵育 5 小時(shí)，并使用 Moore 和 Stein， JBC， 176， 367， （1948） 比色茚三酮法測定膠原蛋白分解的程度。釋放的氨基酸表示為每毫克膠原酶的微摩爾亮氨酸。
用途：粗膠原酶廣泛用于酶促原代細(xì)胞分離和組織解離程序。大多數(shù)研究人員使用粗膠原酶制劑，如 1、2、3 和 4 型或色譜純化的膠原酶（代碼：CLSPA）;后者通常與彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等次級酶結(jié)合。為了獲得最佳結(jié)果，必須根據(jù)要解離的組織定制蛋白水解活性的精確混合物。不同組織類型和有效性之間的相關(guān)性很好，但并不完美，可能部分取決于使用和目標(biāo)參數(shù)以及批次間差異。有關(guān)更多信息，請參閱膠原酶采樣計(jì)劃信息。Worthington 還出版了一份組織解離指南，該指南提供了有關(guān)用于這些應(yīng)用的酶的其他信息以及許多細(xì)胞和組織類型的具體參考。