測(cè)定意義:復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是線粒體內(nèi)膜中最大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對(duì)電子從NADH傳遞給CoQ,同時(shí)可使O2還原生成O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測(cè)定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
測(cè)定原理:復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
測(cè)定原理:復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。