一個(gè)世紀(jì)以來(lái),生物學(xué)家們一直夢(mèng)想著能夠透過(guò)器官甚至整個(gè)機(jī)體,親眼看到細(xì)胞連接和精細(xì)結(jié)構(gòu),現(xiàn)在隨著組織透明化技術(shù)的完善,這一夢(mèng)想終于成為了現(xiàn)實(shí)。
原理
VA-044 作為組織透明化技術(shù)中起關(guān)鍵作用的水溶性偶氮引發(fā)劑,普遍適用于高分子合成的水溶液聚合與乳液聚合。在 CLARITY 方法中,VA-044 作為引發(fā)劑,催化丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺和 PFA 形成水凝膠。
2013 年3 月,斯坦福大學(xué)的 Karl Deisseroth 博士領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在自然雜志(Nature)上發(fā)表了 Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的論文,文中介紹了制備組織的方法 CLARITY。該方法是將組織浸透在水凝膠單體溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,經(jīng)電泳使組織呈現(xiàn)透明。這種水溶膠—組織雜交的方式可以維持組織的原有結(jié)構(gòu),使生物分子結(jié)合到水凝膠的網(wǎng)孔上。重要的是脂類不會(huì)結(jié)合到水凝膠上,因而可以通過(guò)這種方式將脂類有效去除。通過(guò)這種方法制備的組織樣品可用于后期的影像實(shí)驗(yàn),免疫染色,原位雜交等實(shí)驗(yàn)。
CLARITY 可用于熒光蛋白質(zhì)和抗體的免疫染色,可作為解析腦神經(jīng)回路的有效工具。VA-044 是論文實(shí)驗(yàn)步驟中透明化工程的使用試劑。
特點(diǎn)? 優(yōu)勢(shì)
操作簡(jiǎn)單,固定蛋白后只需進(jìn)行電泳;
可保持組織、器官和全身結(jié)構(gòu)的完整性;
可進(jìn)行原位雜交和免疫組化實(shí)驗(yàn),可進(jìn)行多輪染色和脫色步驟。
原理
VA-044 作為組織透明化技術(shù)中起關(guān)鍵作用的水溶性偶氮引發(fā)劑,普遍適用于高分子合成的水溶液聚合與乳液聚合。在 CLARITY 方法中,VA-044 作為引發(fā)劑,催化丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺和 PFA 形成水凝膠。
2013 年3 月,斯坦福大學(xué)的 Karl Deisseroth 博士領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在自然雜志(Nature)上發(fā)表了 Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的論文,文中介紹了制備組織的方法 CLARITY。該方法是將組織浸透在水凝膠單體溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,經(jīng)電泳使組織呈現(xiàn)透明。這種水溶膠—組織雜交的方式可以維持組織的原有結(jié)構(gòu),使生物分子結(jié)合到水凝膠的網(wǎng)孔上。重要的是脂類不會(huì)結(jié)合到水凝膠上,因而可以通過(guò)這種方式將脂類有效去除。通過(guò)這種方法制備的組織樣品可用于后期的影像實(shí)驗(yàn),免疫染色,原位雜交等實(shí)驗(yàn)。
CLARITY 可用于熒光蛋白質(zhì)和抗體的免疫染色,可作為解析腦神經(jīng)回路的有效工具。VA-044 是論文實(shí)驗(yàn)步驟中透明化工程的使用試劑。
特點(diǎn)? 優(yōu)勢(shì)
操作簡(jiǎn)單,固定蛋白后只需進(jìn)行電泳;
可保持組織、器官和全身結(jié)構(gòu)的完整性;
可進(jìn)行原位雜交和免疫組化實(shí)驗(yàn),可進(jìn)行多輪染色和脫色步驟。