纖維素酶R-10（Cellulase R-10，CAS NO. 9012-54-8），也稱為Cellulase "Onozuka" R-10，來(lái)源于綠色木霉（Trichoderma viride）。纖維素酶R-10是一種酶混合物，包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和蛋白酶。通常與離析酶R-10（Macerozyme R-10）（貨號(hào)：MX7351）聯(lián)合使用降解植物細(xì)胞壁以制備原生質(zhì)體。
本品以凍干粉形式提供，含>10,000 U/g纖維素酶活性。一個(gè)活力單位的纖維素酶能夠降解羧甲基纖維素釋放1 μmole葡萄糖。纖維素酶活性可能被糖類化合物如葡萄糖或纖維二糖所抑制。
酶溶液的制備
【注意】：以下酶溶液的制備體系包括酶的使用濃度僅作為參考，用戶可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件或參考文獻(xiàn)來(lái)做調(diào)整。
1–1.5% 纖維素酶R-10（0.1-0.15 g/10ml）
0.2–0.4% 離析酶R-10（0.02-0.04 g/10ml）
0.4M 甘lu醇（0.8M 甘lu醇儲(chǔ)存液）
20mM KCl（2M KCl儲(chǔ)存液）
20mM MES, pH 5.7（0.2M MES, pH 5.7儲(chǔ)存液）
于55℃加熱上述酶溶液10min（目的是為了失活蛋白酶并提高酶溶解性），冷卻至室溫后再加入：
10mM CaCl2（1M CaCl2儲(chǔ)存液）
5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)（可選）
0.1% BSA（10% BSA儲(chǔ)存液，無(wú)菌）（可選）
配制好的酶溶液是透明的，可用低吸附的0.45μm濾膜過(guò)濾后，酶溶液（pH 5-7）于2-8℃穩(wěn)定保存24h。建議根據(jù)實(shí)際需要來(lái)配置酶溶液，并盡快用完。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本品以凍干粉形式提供，含>10,000 U/g纖維素酶活性。一個(gè)活力單位的纖維素酶能夠降解羧甲基纖維素釋放1 μmole葡萄糖。纖維素酶活性可能被糖類化合物如葡萄糖或纖維二糖所抑制。
酶溶液的制備
【注意】：以下酶溶液的制備體系包括酶的使用濃度僅作為參考，用戶可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件或參考文獻(xiàn)來(lái)做調(diào)整。
1–1.5% 纖維素酶R-10（0.1-0.15 g/10ml）
0.2–0.4% 離析酶R-10（0.02-0.04 g/10ml）
0.4M 甘lu醇（0.8M 甘lu醇儲(chǔ)存液）
20mM KCl（2M KCl儲(chǔ)存液）
20mM MES, pH 5.7（0.2M MES, pH 5.7儲(chǔ)存液）
于55℃加熱上述酶溶液10min（目的是為了失活蛋白酶并提高酶溶解性），冷卻至室溫后再加入：
10mM CaCl2（1M CaCl2儲(chǔ)存液）
5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)（可選）
0.1% BSA（10% BSA儲(chǔ)存液，無(wú)菌）（可選）
配制好的酶溶液是透明的，可用低吸附的0.45μm濾膜過(guò)濾后，酶溶液（pH 5-7）于2-8℃穩(wěn)定保存24h。建議根據(jù)實(shí)際需要來(lái)配置酶溶液，并盡快用完。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
