離析酶R-10(Macerozyme R-10,CAS NO. 9032-75-1),來(lái)源根霉屬菌(Rhizopus sp.)的一種浸解酶(Macerating enzyme),含高果膠酶和半纖維素酶活性,可用來(lái)降解植物組織以分離單細(xì)胞。常與纖維素酶R-10(Cellulase "Onozuka R-10")(貨號(hào):MX7352)聯(lián)合使用以制備植物原生質(zhì)體。
離析酶R-10是多功能酶復(fù)合物,含以下特征:
酶活性:>3,000 U/g 果膠酶:0.5 U/mg
纖維素酶:0.1 U/mg 半纖維素酶:0.25 U/mg
zuijia工作pH:3.5 - 7.0 zuijia工作溫度:40℃-50℃
溶解性:溶于水
酶溶液的制備
【注意】:以下酶溶液的制備體系包括酶的使用濃度僅作為參考,用戶可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件或參考文獻(xiàn)來(lái)做調(diào)整。
1–1.5% 纖維素酶R-10(0.1-0.15 g/10ml)
0.2–0.4% 離析酶R-10(0.02-0.04 g/10ml)
0.4M 甘lu醇(0.8M 甘lu醇儲(chǔ)存液)
20mM KCl(2M KCl儲(chǔ)存液)
20mM MES, pH 5.7(0.2M MES, pH 5.7儲(chǔ)存液)
于55℃加熱上述酶溶液10min(目的是為了失活蛋白酶并提高酶溶解性),冷卻至室溫后再加入:
10mM CaCl2(1M CaCl2儲(chǔ)存液)
5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)(可選)
0.1% BSA(10% BSA儲(chǔ)存液,無(wú)菌)(可選)
配制好的酶溶液是透明的,可用低吸附的0.45μm濾膜過(guò)濾后,酶溶液(pH 5-7)于2-8℃穩(wěn)定保存24h。建議根據(jù)實(shí)際需要來(lái)配置酶溶液,并盡快用完。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。