產(chǎn)品說明:
靈敏度&穩(wěn)定性高
性價比高
熒光顯微鏡和流式檢測雙重方法檢測
細胞凋亡是指為維持有機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。正常情況下任何細胞在形成過程中發(fā)生的異常都會通過凋亡消除。例如體內(nèi)的癌細胞增長為腫瘤的過程會受細胞凋亡的引導(dǎo)而被抑制。然而在抑癌基因p53出現(xiàn)問題時,凋亡就不會誘導(dǎo)發(fā)生,從而導(dǎo)致癌細胞的不斷增長。細胞凋亡可以通過細胞形態(tài)的變化或生物化學(xué)的變化來檢測。目前常用的指標(biāo)有caspase活性變化、DNA碎片、磷脂酰 si an suan 的外翻等。
Annexin V染色的細胞可以用于檢測細胞凋亡早期的細胞膜變化。在細胞凋亡早期,膜磷脂酰 si an suan 由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰 si an suan 有高度親和力,可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰 si an suan 與凋亡早期細胞的胞膜特異性結(jié)合,因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。用綠色熒光FITC標(biāo)記的Annexin V通過流式細胞儀或熒光顯微鏡可以檢測到細胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一種核酸染料,PI只能透過凋亡晚期和死細胞的細胞膜,因此Annexin V和PI結(jié)合使用,可以區(qū)分凋亡早晚期的細胞及死細胞。
熒光參數(shù)
-流式細胞儀檢測
1. 加樣到流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex = 488 nm;發(fā)射波長Em = 530 nm。
2. Annexin V-FITC的綠色熒光通過FITC通道 (FL1) 檢測;PI的紅色熒光通過PI 通道 (FL2或FL3) 檢測 (建議使用FL3)。
-熒光顯微鏡檢測
將細胞懸液滴到玻片上,置于顯微鏡上使用合適的濾光片檢測。* 由于EDTA會對細胞膜的特定部位有損傷,建議使用不含EDTA的 yi mei 消化貼壁細胞。
靈敏度&穩(wěn)定性高
性價比高
熒光顯微鏡和流式檢測雙重方法檢測
細胞凋亡是指為維持有機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。正常情況下任何細胞在形成過程中發(fā)生的異常都會通過凋亡消除。例如體內(nèi)的癌細胞增長為腫瘤的過程會受細胞凋亡的引導(dǎo)而被抑制。然而在抑癌基因p53出現(xiàn)問題時,凋亡就不會誘導(dǎo)發(fā)生,從而導(dǎo)致癌細胞的不斷增長。細胞凋亡可以通過細胞形態(tài)的變化或生物化學(xué)的變化來檢測。目前常用的指標(biāo)有caspase活性變化、DNA碎片、磷脂酰 si an suan 的外翻等。
Annexin V染色的細胞可以用于檢測細胞凋亡早期的細胞膜變化。在細胞凋亡早期,膜磷脂酰 si an suan 由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰 si an suan 有高度親和力,可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰 si an suan 與凋亡早期細胞的胞膜特異性結(jié)合,因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。用綠色熒光FITC標(biāo)記的Annexin V通過流式細胞儀或熒光顯微鏡可以檢測到細胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一種核酸染料,PI只能透過凋亡晚期和死細胞的細胞膜,因此Annexin V和PI結(jié)合使用,可以區(qū)分凋亡早晚期的細胞及死細胞。
熒光參數(shù)
-流式細胞儀檢測
1. 加樣到流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex = 488 nm;發(fā)射波長Em = 530 nm。
2. Annexin V-FITC的綠色熒光通過FITC通道 (FL1) 檢測;PI的紅色熒光通過PI 通道 (FL2或FL3) 檢測 (建議使用FL3)。
-熒光顯微鏡檢測
將細胞懸液滴到玻片上,置于顯微鏡上使用合適的濾光片檢測。* 由于EDTA會對細胞膜的特定部位有損傷,建議使用不含EDTA的 yi mei 消化貼壁細胞。