產(chǎn)品說明:
TMB單組分HRP微孔底物在弱酸性緩沖液中含有3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺?;淖鳛榧从眯腿芤禾峁N捶磻?yīng)的基材外觀應(yīng)為無色或非常淺的黃色。當(dāng)該底物體系與過氧化物酶反應(yīng)時(shí),得到可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物??梢允褂眠m當(dāng)?shù)慕K止溶液停止反應(yīng),產(chǎn)生可溶性黃色或可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物,具體取決于所使用的終止試劑,其穩(wěn)定至少1小時(shí)。TMB 單組分 HRP 微孔底物不推薦用于需要沉淀反應(yīng)產(chǎn)物的膜或免疫組織化學(xué)應(yīng)用。
儲(chǔ)存和產(chǎn)品穩(wěn)定性:
儲(chǔ)存在 2°C - 8°C。 該基材對光敏感,應(yīng)避免陽光直射和紫外線源。
危害識(shí)別:
TMB單組分HRP微孔基質(zhì)不是有害物質(zhì)或混合物。
制備:
TMB單組分HRP微孔底物作為即用型解決方案提供。使用前應(yīng)讓產(chǎn)品平衡至室溫(25°C)。
推薦基板體積:
che di 清洗板后,向每個(gè)孔中加入 100 μL 底物溶液。顏色將立即開始發(fā)展,并在 15 – 30 分鐘內(nèi)完成。
吸光度測量:
動(dòng)力學(xué)測定:
產(chǎn)生可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物,可在 370 nm 或 620 nm 至 650 nm 范圍內(nèi)讀取。為獲得最佳結(jié)果,應(yīng)在吸光度值超過2.0 OD單位之前監(jiān)測和讀取樣品吸光度值。
終點(diǎn)檢測:
停止后TMB基板變黃。在 450 nm 的波長下讀取。
終止溶液:可以使用等體積 (100 μL) 的 1 N HCl 或 0.18 M H 2 SO4 停止底物反應(yīng)。(ELISA停止液,貨號(hào)E115,可從Bethyl實(shí)驗(yàn)室購買。加入酸會(huì)使藍(lán)色變成黃色并停止酶促反應(yīng)。
何時(shí)停止底物反應(yīng)?底物反應(yīng)的停止點(diǎn)通常由所使用的ELISA讀數(shù)儀決定。許多 ELISA 讀數(shù)儀記錄的吸光度高達(dá) 2.0 O.D. 應(yīng)監(jiān)測板的外徑值,并在正孔不再可記錄之前停止底物。由于停止反應(yīng)會(huì)使樣品吸光度值增加約三倍,因此當(dāng)值達(dá)到約0.7OD單位時(shí),應(yīng)監(jiān)測樣品OD值并停止底物反應(yīng)。
底物反應(yīng)太快?為了降低底物反應(yīng)的強(qiáng)度,建議進(jìn)一步稀釋免疫測定中的HRP偶聯(lián)物和/或抗體。不建議稀釋底物。
TMB單組分HRP微孔底物在弱酸性緩沖液中含有3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺?;淖鳛榧从眯腿芤禾峁N捶磻?yīng)的基材外觀應(yīng)為無色或非常淺的黃色。當(dāng)該底物體系與過氧化物酶反應(yīng)時(shí),得到可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物??梢允褂眠m當(dāng)?shù)慕K止溶液停止反應(yīng),產(chǎn)生可溶性黃色或可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物,具體取決于所使用的終止試劑,其穩(wěn)定至少1小時(shí)。TMB 單組分 HRP 微孔底物不推薦用于需要沉淀反應(yīng)產(chǎn)物的膜或免疫組織化學(xué)應(yīng)用。
儲(chǔ)存和產(chǎn)品穩(wěn)定性:
儲(chǔ)存在 2°C - 8°C。 該基材對光敏感,應(yīng)避免陽光直射和紫外線源。
危害識(shí)別:
TMB單組分HRP微孔基質(zhì)不是有害物質(zhì)或混合物。
制備:
TMB單組分HRP微孔底物作為即用型解決方案提供。使用前應(yīng)讓產(chǎn)品平衡至室溫(25°C)。
推薦基板體積:
che di 清洗板后,向每個(gè)孔中加入 100 μL 底物溶液。顏色將立即開始發(fā)展,并在 15 – 30 分鐘內(nèi)完成。
吸光度測量:
動(dòng)力學(xué)測定:
產(chǎn)生可溶性藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物,可在 370 nm 或 620 nm 至 650 nm 范圍內(nèi)讀取。為獲得最佳結(jié)果,應(yīng)在吸光度值超過2.0 OD單位之前監(jiān)測和讀取樣品吸光度值。
終點(diǎn)檢測:
停止后TMB基板變黃。在 450 nm 的波長下讀取。
終止溶液:可以使用等體積 (100 μL) 的 1 N HCl 或 0.18 M H 2 SO4 停止底物反應(yīng)。(ELISA停止液,貨號(hào)E115,可從Bethyl實(shí)驗(yàn)室購買。加入酸會(huì)使藍(lán)色變成黃色并停止酶促反應(yīng)。
何時(shí)停止底物反應(yīng)?底物反應(yīng)的停止點(diǎn)通常由所使用的ELISA讀數(shù)儀決定。許多 ELISA 讀數(shù)儀記錄的吸光度高達(dá) 2.0 O.D. 應(yīng)監(jiān)測板的外徑值,并在正孔不再可記錄之前停止底物。由于停止反應(yīng)會(huì)使樣品吸光度值增加約三倍,因此當(dāng)值達(dá)到約0.7OD單位時(shí),應(yīng)監(jiān)測樣品OD值并停止底物反應(yīng)。
底物反應(yīng)太快?為了降低底物反應(yīng)的強(qiáng)度,建議進(jìn)一步稀釋免疫測定中的HRP偶聯(lián)物和/或抗體。不建議稀釋底物。



