產(chǎn)品說明:
這種酶聯(lián)免疫吸附測定 （ELISA） 用于檢測血清、血漿、牛奶和初乳中的人 α-1-抗胰蛋白酶。該試劑盒包含足夠的組分，可在多達(dá) 40 個(gè)樣品中定量人 α-1-抗胰蛋白酶，一式兩份測試。
背景
人α-1抗胰蛋白酶（A1AT）是一種52-kDa糖蛋白，屬于一類稱為serpins或絲氨酸蛋白酶抑制劑的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)通過與蛋白酶共價(jià)結(jié)合來滅活蛋白酶。這是一個(gè)極其重要的作用，因?yàn)閷?dǎo)致蛋白酶活性增加或潛在不受控制的生理?xiàng)l件最終會(huì)導(dǎo)致組織分解。例如，一種稱為α-1抗胰蛋白酶缺乏癥的遺傳性疾病會(huì)導(dǎo)致肺組織退化，從而導(dǎo)致肺氣腫。
正常血清或血漿、初乳和成熟乳中A1AT的濃度分別為1.5-3.5毫克/毫升、0.1-0.5毫克/毫升和3-10微克/毫升。然而，在感染、炎癥或某些疾病狀態(tài)時(shí)，水平可能會(huì)發(fā)生顯著變化。雖然重組A1AT的使用尚未被批準(zhǔn)用于人類應(yīng)用，但來自人血漿的濃縮物已被批準(zhǔn)用于治療用途。因此，準(zhǔn)確定量血漿或血清中的A1AT對于研究診斷目的以及監(jiān)測治療方案的有效性非常重要。
檢測原理
該套件基于三明治 ELISA。測試樣品中存在的人α-1-抗胰蛋白酶被預(yù)吸附在微量滴定孔表面的抗人α-1-抗胰蛋白酶抗體捕獲。樣品結(jié)合后，洗掉未結(jié)合的蛋白質(zhì)和分子，并將生物素化的檢測抗體添加到孔中以與捕獲的α-1-抗胰蛋白酶結(jié)合。然后加入鏈親和素偶聯(lián)的辣根過氧化物酶（SA-HRP）以催化與顯色底物TMB（3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺）的比色反應(yīng)。比色反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，當(dāng)加入稀硫酸終止反應(yīng)時(shí)，該產(chǎn)物變?yōu)辄S色。黃色產(chǎn)物在450nm處的吸光度與樣品中存在的α-1-抗胰蛋白酶分析物的量成正比，并且可以生成四參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后，可以通過從與樣品平行生成的標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值它們的吸光度來量化測試樣品中的α-1-抗胰蛋白酶濃度。在考慮樣品稀釋度后，最終可以計(jì)算出原始樣品中的α-1-抗胰蛋白酶濃度。
這種酶聯(lián)免疫吸附測定 （ELISA） 用于檢測血清、血漿、牛奶和初乳中的人 α-1-抗胰蛋白酶。該試劑盒包含足夠的組分，可在多達(dá) 40 個(gè)樣品中定量人 α-1-抗胰蛋白酶，一式兩份測試。
背景
人α-1抗胰蛋白酶（A1AT）是一種52-kDa糖蛋白，屬于一類稱為serpins或絲氨酸蛋白酶抑制劑的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)通過與蛋白酶共價(jià)結(jié)合來滅活蛋白酶。這是一個(gè)極其重要的作用，因?yàn)閷?dǎo)致蛋白酶活性增加或潛在不受控制的生理?xiàng)l件最終會(huì)導(dǎo)致組織分解。例如，一種稱為α-1抗胰蛋白酶缺乏癥的遺傳性疾病會(huì)導(dǎo)致肺組織退化，從而導(dǎo)致肺氣腫。
正常血清或血漿、初乳和成熟乳中A1AT的濃度分別為1.5-3.5毫克/毫升、0.1-0.5毫克/毫升和3-10微克/毫升。然而，在感染、炎癥或某些疾病狀態(tài)時(shí)，水平可能會(huì)發(fā)生顯著變化。雖然重組A1AT的使用尚未被批準(zhǔn)用于人類應(yīng)用，但來自人血漿的濃縮物已被批準(zhǔn)用于治療用途。因此，準(zhǔn)確定量血漿或血清中的A1AT對于研究診斷目的以及監(jiān)測治療方案的有效性非常重要。
檢測原理
該套件基于三明治 ELISA。測試樣品中存在的人α-1-抗胰蛋白酶被預(yù)吸附在微量滴定孔表面的抗人α-1-抗胰蛋白酶抗體捕獲。樣品結(jié)合后，洗掉未結(jié)合的蛋白質(zhì)和分子，并將生物素化的檢測抗體添加到孔中以與捕獲的α-1-抗胰蛋白酶結(jié)合。然后加入鏈親和素偶聯(lián)的辣根過氧化物酶（SA-HRP）以催化與顯色底物TMB（3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺）的比色反應(yīng)。比色反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，當(dāng)加入稀硫酸終止反應(yīng)時(shí)，該產(chǎn)物變?yōu)辄S色。黃色產(chǎn)物在450nm處的吸光度與樣品中存在的α-1-抗胰蛋白酶分析物的量成正比，并且可以生成四參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后，可以通過從與樣品平行生成的標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值它們的吸光度來量化測試樣品中的α-1-抗胰蛋白酶濃度。在考慮樣品稀釋度后，最終可以計(jì)算出原始樣品中的α-1-抗胰蛋白酶濃度。