產(chǎn)品說明：
這種酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）用于檢測血清或血漿中的小鼠IgM。由于特異型和同種異體變異，本品可能無法準確定量雜交瘤、單克隆或骨髓瘤。該試劑盒包含足夠的組分，可在多達 40 個樣品中定量小鼠 IgM，一式兩份測試。
背景
哺乳動物免疫球蛋白有五類：IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。在小鼠中，IgG類進一步分為四個亞類：IgG1，IgG2a / IgG2c（菌株特異性），IgG2b和IgG3.一般免疫球蛋白結(jié)構(gòu)被描述為兩個重鏈和兩個輕鏈（H2L2）多肽通過半胱氨酸殘基的二硫鍵連接在一起。IgM重鏈是mu型鏈，輕鏈是kappa型和λ型。IgM遵循一般的H2L2結(jié)構(gòu)，但可以作為分泌的五聚體或作為在成熟原始B細胞表面表達的膜結(jié)合單體存在。五聚體形式由5個共價連接的H2L2亞基組成，它們在分泌之前通過μ鏈間二硫鍵和J鏈的摻入進行端到端聚合（Richardson&Feinstein，1978）。IgM 是第一類響應(yīng)外來抗原出現(xiàn)的抗體。由于IgM是一種五聚體，因此它具有多反應(yīng)性和狂熱的粘合劑。IgM也是補體系統(tǒng)的強大激活劑（Kimball，1990）。在沒有抗原刺激，天然IgM的情況下，IgM的存在被認為在先天免疫和對細菌感染的直接防御中起重要作用（Boes，Prodeus，Schmidt，Carroll，&Chen，1998）。正常BALB / c小鼠中血清IgM的報道濃度約為1.0mg / ml（Quimby&Luong Richard，2007）。
檢測原理
該套件基于三明治 ELISA。測試樣品中存在的小鼠IgM被預(yù)吸附在微量滴定孔表面上的抗小鼠IgM抗體捕獲。樣品結(jié)合后，洗掉未結(jié)合的蛋白質(zhì)和分子，并將生物素化的檢測抗體添加到孔中以與捕獲的IgM結(jié)合。然后加入鏈親和素偶聯(lián)辣根過氧化物酶（SA-HRP）以催化與顯色底物TMB（3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺）的比色反應(yīng)。比色反應(yīng)產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，當(dāng)加入稀硫酸終止反應(yīng)時，該產(chǎn)物變?yōu)辄S色。黃色產(chǎn)物在450nm處的吸光度與樣品中存在的IgM分析物的量成正比，可以生成四參數(shù)標(biāo)準曲線。然后，可以通過從與樣品平行生成的標(biāo)準曲線中插值其吸光度來量化測試樣品中的IgM濃度。分解樣品稀釋度后，最終可以計算出原始樣品中的IgM濃度。
這種酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）用于檢測血清或血漿中的小鼠IgM。由于特異型和同種異體變異，本品可能無法準確定量雜交瘤、單克隆或骨髓瘤。該試劑盒包含足夠的組分，可在多達 40 個樣品中定量小鼠 IgM，一式兩份測試。
背景
哺乳動物免疫球蛋白有五類：IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。在小鼠中，IgG類進一步分為四個亞類：IgG1，IgG2a / IgG2c（菌株特異性），IgG2b和IgG3.一般免疫球蛋白結(jié)構(gòu)被描述為兩個重鏈和兩個輕鏈（H2L2）多肽通過半胱氨酸殘基的二硫鍵連接在一起。IgM重鏈是mu型鏈，輕鏈是kappa型和λ型。IgM遵循一般的H2L2結(jié)構(gòu)，但可以作為分泌的五聚體或作為在成熟原始B細胞表面表達的膜結(jié)合單體存在。五聚體形式由5個共價連接的H2L2亞基組成，它們在分泌之前通過μ鏈間二硫鍵和J鏈的摻入進行端到端聚合（Richardson&Feinstein，1978）。IgM 是第一類響應(yīng)外來抗原出現(xiàn)的抗體。由于IgM是一種五聚體，因此它具有多反應(yīng)性和狂熱的粘合劑。IgM也是補體系統(tǒng)的強大激活劑（Kimball，1990）。在沒有抗原刺激，天然IgM的情況下，IgM的存在被認為在先天免疫和對細菌感染的直接防御中起重要作用（Boes，Prodeus，Schmidt，Carroll，&Chen，1998）。正常BALB / c小鼠中血清IgM的報道濃度約為1.0mg / ml（Quimby&Luong Richard，2007）。
檢測原理
該套件基于三明治 ELISA。測試樣品中存在的小鼠IgM被預(yù)吸附在微量滴定孔表面上的抗小鼠IgM抗體捕獲。樣品結(jié)合后，洗掉未結(jié)合的蛋白質(zhì)和分子，并將生物素化的檢測抗體添加到孔中以與捕獲的IgM結(jié)合。然后加入鏈親和素偶聯(lián)辣根過氧化物酶（SA-HRP）以催化與顯色底物TMB（3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺）的比色反應(yīng)。比色反應(yīng)產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，當(dāng)加入稀硫酸終止反應(yīng)時，該產(chǎn)物變?yōu)辄S色。黃色產(chǎn)物在450nm處的吸光度與樣品中存在的IgM分析物的量成正比，可以生成四參數(shù)標(biāo)準曲線。然后，可以通過從與樣品平行生成的標(biāo)準曲線中插值其吸光度來量化測試樣品中的IgM濃度。分解樣品稀釋度后，最終可以計算出原始樣品中的IgM濃度。