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AAT Bioquest  YZ-2582 ReadiUse? Preactivated PE-Cy7 Tandem 1mg
產(chǎn)品說明：

消光系數(shù)（厘米-1M-1)	激發(fā)（納米）	發(fā)射（納米）
1960000	565	778

PE-Cy7是流式細(xì)胞術(shù)中常用的顏色。其初級(jí)吸收峰在565 nm處，發(fā)射峰在780 nm處。亞洲空運(yùn)中心生物探索提供這種預(yù)活化的PE-Cy7，以促進(jìn)PE-Cy7與抗體和其他蛋白質(zhì)（如鏈霉親和素和其他二級(jí)試劑）的串聯(lián)偶聯(lián)。我們的預(yù)活化 PE-Cy7 串聯(lián)蛋白可隨時(shí)偶聯(lián)，與傳統(tǒng)繁瑣的基于 SMCC 的偶聯(lián)化學(xué)相比，產(chǎn)量要高得多。此外，我們的預(yù)活化PE-Cy7串聯(lián)通過蛋白質(zhì)中豐富的氨基與蛋白質(zhì)偶聯(lián)，而SMCC化學(xué)針對(duì)必須通過還原抗體再生的硫醇基團(tuán)。
 
組件
 
答：準(zhǔn)備使用?預(yù)激活的PE-Cy7串聯(lián)  1瓶（1毫克）
B：頰銃石? MTA  1 瓶 （100 μg）
C：離心脫鹽塔 不包括
 
示例協(xié)議
 
一目了然
重要的PE-Cy7串聯(lián)是用我們的Buccutite? FOL預(yù)修改的。您的抗體（或其他蛋白質(zhì)）用我們的頰石? MTA修飾，以產(chǎn)生MTA修飾的蛋白質(zhì)。MTA修飾的蛋白質(zhì)很容易與FOL修飾的PE-Cy7串聯(lián)（提供）反應(yīng)，得到所需的PE-Cy7串聯(lián)抗體偶聯(lián)物。
 
實(shí)驗(yàn)方案樣本
用頰石? MTA制備預(yù)活化抗體

1. 在DMSO中以~10毫克/毫升的速度重建頰鈦MTA?。

注意 將未使用的MTA儲(chǔ)存在-20°C;它最多可用于兩個(gè)凍融循環(huán)。

2. 在pH = 8.5 - 9.0緩沖液中制備濃度高于1mg / ml的目標(biāo)抗體（Ab）。
3. 以 8 - 10 μg MTA/100 μg Ab 的比例將 MTA 與 Ab 溶液添加。
4. 充分混合并在室溫下反應(yīng)60分鐘，在反應(yīng)過程中旋轉(zhuǎn)。
5. 用脫鹽柱純化反應(yīng)混合物以除去任何未反應(yīng)的MTA。將緩沖區(qū)交換為 PBS 或您選擇的其他緩沖區(qū)。
6. 收集MTA激活的Ab.估計(jì)原始起始量的70%產(chǎn)率的濃度。

 
與預(yù)活化的 PE-Cy7 串聯(lián)偶聯(lián)物

1. 在7μL ddH 中重建預(yù)激活的 PE-Cy100 串聯(lián)2O 至 10 毫克/毫升。

注意 重組的預(yù)激活PE-Cy7串聯(lián)不穩(wěn)定，不能存放超過一個(gè)月。

2. 將預(yù)活化的 PE-Cy7串聯(lián)以 300μg PE-Cy7串聯(lián)/100 μg MTA 活化抗體的比例直接添加到MTA激活的靶標(biāo)Ab溶液中。
3. 在室溫下將混合物旋轉(zhuǎn)1-2小時(shí)。
4. Ab/PE-Cy7串聯(lián)偶聯(lián)物現(xiàn)已準(zhǔn)備就緒。

注意 抗體偶聯(lián)物應(yīng)在存在載體蛋白（例如 0.5% 牛血清白蛋白）和0.1-0.02% 疊***的情況下儲(chǔ)存在 >0.05 mg/mL。
注意 Ab/PE-Cy7串聯(lián)可在4°C下儲(chǔ)存兩個(gè)月。

5. 可選：Ab/PE-Cy7串聯(lián)可以通過體積排阻色譜進(jìn)一步純化，以獲得更好的性能。