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產(chǎn)品說明：
ReadiPrep? 核/細胞質(zhì)分級分離試劑盒可從哺乳動物細胞或組織中逐步分離細胞核和細胞質(zhì)提取物。分離的蛋白質(zhì)具有高濃度并保持其生物活性。ReadiPrep? 核/細胞質(zhì)分離試劑盒的核和細胞質(zhì)提取物與許多下游應用兼容，包括酶活性測定和熒光蛋白質(zhì)印跡等。
 
組件
組分A：胞質(zhì)提取緩沖液    1 瓶 （25 毫升）
組件B：核萃取緩沖液  1 瓶 （8 毫升）
組分C：10X蛋白酶抑制劑 1 瓶 （4 mL）
組件 D：DTT （1 M）      1 瓶 （100 uL）
 
示例協(xié)議
 
協(xié)議摘要
 

1. 用PBS沖洗細胞
2. 加入 500 μL 細胞質(zhì)提取緩沖液
3. 離心20秒
4. 收集上清液（細胞質(zhì)提取物）
5. 將沉淀重新懸浮在 150 μL 1X 高鹽緩沖液中
6. 離心20分鐘
7. 收集上清液（核提取物）

 
重要說明
在開始實驗之前，請在室溫下解凍所有組分。
 
工作溶液的制備
1. 胞質(zhì)提取緩沖液 （1X）：
將 100 μL 10X 蛋白酶抑制劑（組分 C）和 1 μL DTT（組分 D）加入 0.9 mL 細胞質(zhì)提取緩沖液（組分 A）中。
 
2. 核提取緩沖液 （1X）：
將 100 μL 10X 蛋白酶抑制劑（組分 C）和 1 μL DTT（組分 D）加入 0.9 mL 核提取緩沖液（組分 B）中。
 
注意：0.5 mL 1X 細胞質(zhì)提取緩沖液和 150 μL 1X 核提取緩沖液足以進行 1 次測定，根據(jù)需要制備新鮮緩沖液。
 
實驗方案樣本

1. 用冷PBS沖洗細胞1次。對于懸浮細胞，通過離心收集細胞。
2. 向細胞中加入 500 μL 1X 細胞質(zhì)提取緩沖液。對于貼壁細胞，將貼壁細胞刮入 1.5 mL 離心管中。
3. 劇烈渦旋以完全重新懸浮細胞。
4. 以16，000g離心1-2分鐘，并將上清液（細胞質(zhì)提取物）轉(zhuǎn)移到另一個干凈的管中。將管子放在冰上以備下游應用或儲存在-80°C。
5. 將沉淀重懸于150μL 1X核提取緩沖液中。
6. 劇烈渦旋以完全重新懸浮顆粒。
7. 將試管在 4°C 下旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。
8. 以16，000g離心20分鐘，然后將上清液（核提取物）轉(zhuǎn)移到另一個干凈的管中。將管子放在冰上以備下游應用或儲存在-80°C。