產(chǎn)品說明:
RereadyUse?離心色譜柱填充聚丙烯酰胺P-6-DG基質(zhì),用于緩沖液交換和脫鹽應(yīng)用。將材料涂覆到離心柱上時(shí),小于色譜柱排除限(MW~6000)的物質(zhì)將保留在色譜柱中,蛋白質(zhì)等大分子(MW高于15,000)將用緩沖液洗脫。樣品體積范圍為 30 uL 至 100 uL。它們與帶有 2.0 ml 微量離心管或 12 x 75 試管的擺動(dòng)桶離心機(jī)兼容。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
RCF = 相對離心力,
RPM = 轉(zhuǎn)子的速度
r = 從轉(zhuǎn)子中心到 Bio-Spin 柱中間測量的半徑(以厘米為單位)
RereadyUse?離心色譜柱填充聚丙烯酰胺P-6-DG基質(zhì),用于緩沖液交換和脫鹽應(yīng)用。將材料涂覆到離心柱上時(shí),小于色譜柱排除限(MW~6000)的物質(zhì)將保留在色譜柱中,蛋白質(zhì)等大分子(MW高于15,000)將用緩沖液洗脫。樣品體積范圍為 30 uL 至 100 uL。它們與帶有 2.0 ml 微量離心管或 12 x 75 試管的擺動(dòng)桶離心機(jī)兼容。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
- 多次倒置離心柱以懸浮沉降的凝膠并去除任何氣泡。
- 折斷吸頭并將色譜柱放入微量離心管(2 mL)中。取下蓋子,讓多余的填料緩沖液通過重力排出,直到到達(dá)凝膠床的頂部。如果色譜柱沒有開始流動(dòng),請將蓋子推回色譜柱中,然后再次將其取下以開始流動(dòng)。丟棄排出的緩沖液,然后將色譜柱放回試管中。
- 在擺動(dòng)桶離心機(jī)中以1,1×g離心000分鐘以除去保全緩沖液。丟棄緩沖區(qū)。
- 將您選擇的1 mL平衡緩沖液涂在色譜柱上,讓緩沖液通過重力排出,或?qū)⑸V柱離心1分鐘以除去緩沖液。丟棄收集管中的緩沖液。重復(fù)此過程 3-4 次。
- 在2,1×g的擺動(dòng)桶離心機(jī)中離心000分鐘以除去反應(yīng)緩沖液。丟棄緩沖區(qū)。
- 將色譜柱放入干凈的2.0 ml微量離心管或12 x 75 mm試管中。小心地將樣品(20-100μl)直接涂在色譜柱的頂部中心??赡苄枰屑?xì)調(diào)整樣品體積以達(dá)到最佳性能。
- 加載樣品后,將色譜柱以5,1 x g 離心000分鐘。
- 離心后,純化的樣品現(xiàn)在處于平衡緩沖液中,小于色譜柱排阻限(~6000)的分子將被保留。
- 收集洗脫液,并妥善處理用過的色譜柱。注意:離心柱可裝入 2 mL 微量離心管或 12 x 75 mm 試管中,以便在離心過程中采集樣品。使用色譜柱隨附的2 mL微量離心管進(jìn)行初始色譜柱平衡步驟。注意:能夠產(chǎn)生最小力為 1,000 x g 的擺動(dòng)式斗式離心機(jī)適用于 Bio-Spin 色譜柱。在特定轉(zhuǎn)速下產(chǎn)生的引力是微量離心機(jī)轉(zhuǎn)子半徑的函數(shù)。有關(guān)從每分鐘轉(zhuǎn)數(shù) (RPM) 轉(zhuǎn)換為離心力或重力的信息,請參閱水平吊籃離心機(jī)使用手冊?;蛘撸褂孟旅骘@示的公式來計(jì)算達(dá)到 1,000 x g 重力所需的速度(以 RPM 為單位)。
RCF = 相對離心力,
RPM = 轉(zhuǎn)子的速度
r = 從轉(zhuǎn)子中心到 Bio-Spin 柱中間測量的半徑(以厘米為單位)



