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染色液 超濾離心管 
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Amplite 熒光法內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒 
Amplite? Fluorimetric Endotoxin Detection Kit 
產(chǎn)品編號(hào): YZ-60006  CAS號(hào):  
分子式:   分子量:  
EINECS編號(hào):  
Amplite 熒光法內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒
我們提供不同包裝規(guī)格的產(chǎn)品,有需要請(qǐng)電聯(lián)。
產(chǎn)品說(shuō)明:
脂多糖(LPS),也稱(chēng)為內(nèi)毒素,是革蘭氏陰性菌外膜的主要成分。LPS是脊椎動(dòng)物先天免疫系統(tǒng)的有效刺激劑,可引起發(fā)燒,感染性休克并最終死亡。LPS也被認(rèn)為是檢測(cè)細(xì)菌病原體入侵的生物標(biāo)志物,并在極端情況下負(fù)責(zé)炎癥反應(yīng)和內(nèi)毒性休克的發(fā)展。檢測(cè)蛋白質(zhì)、肽或抗體樣品等生物材料中的LPS是生物制造和加工中的一項(xiàng)關(guān)鍵任務(wù)。Amplite?熒光內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒使用內(nèi)毒素綠?,這是一種敏感的熒光底物。內(nèi)毒素綠?在內(nèi)毒素和鱟變形細(xì)胞裂解物(LAL)的存在下水解,LAL是鱟的血細(xì)胞提取物。內(nèi)毒素綠?的水解產(chǎn)物產(chǎn)生強(qiáng)烈的綠色熒光。內(nèi)毒素活性與內(nèi)毒素綠?水解產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度成正比。Amplite?熒光內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒可以檢測(cè)多種內(nèi)毒素(從1 EU/ml到0.001 EU/ml)。它非常靈敏,可在 0 分鐘內(nèi)檢測(cè)到低至 001.30 EU/mL 的內(nèi)毒素。
 
組件
組件 A:   1瓶
組件 B:    1 瓶 (25 毫升)
組件 C:   1瓶
組成D:    1 瓶 (100 EU/mL)
構(gòu)成部分E:    1 瓶 (100 μL)
 
示例協(xié)議
 
協(xié)議摘要
 
  1. 制備內(nèi)毒素綠色?工作溶液
  2. 加入大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品和測(cè)試樣品(25 μL)
  3. 加入鱟變形細(xì)胞裂解液(25 μL)
  4. 在37°C孵育30分鐘
  5. 添加內(nèi)毒素綠色?工作溶液(50 μL)
  6. 在 490 分鐘內(nèi)讀取 Ex/Em=525/10 nm 處的熒光強(qiáng)度
 
重要
在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前,在室溫下解凍所有試劑盒組分。
實(shí)驗(yàn)中使用的所有材料都應(yīng)不含內(nèi)毒素,例如:一次性試管或 1.5 mL 微量離心管、一次性移液器吸頭和一次性 96 孔微孔板或板條。所有實(shí)驗(yàn)室器具的清潔度都需要準(zhǔn)確檢測(cè)給定樣品中的內(nèi)毒素水平。
 
儲(chǔ)備溶液的制備
除非另有說(shuō)明,否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
 
1. 100 X 內(nèi)毒素綠色?儲(chǔ)備液
將 50 μL DMSO 加入內(nèi)毒素綠(組分 A)小瓶中,制成 100X 內(nèi)毒素綠??儲(chǔ)備溶液。
注意 避光。
 
2. 5X鱟變形細(xì)胞裂解液
將 500 μL 無(wú)內(nèi)毒素水(組分 B)加入鱟變形細(xì)胞裂解物(組分 C)小瓶中,制成 5X 鱟變形細(xì)胞裂解液溶液。
 
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液
將 10 μL 100 EU/mL 大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液加入 990 μL 無(wú)內(nèi)毒素水(組分 B)中,生成 1 EU/mL 大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液 (ES1)。然后取1 EU/mL大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液(ES1),在無(wú)內(nèi)毒素水(組分B)中進(jìn)行1:3連續(xù)稀釋?zhuān)玫竭B續(xù)稀釋的大腸桿菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品(ES2 - ES7)。
 
工作溶液的制備
1.內(nèi)毒素綠色?工作溶液
將 50 μL 內(nèi)毒素綠色儲(chǔ)備溶液加入 5 mL 無(wú)內(nèi)毒素水(組分 B)中,制成總體積為 5.05 mL 的內(nèi)毒素綠色??工作溶液。
說(shuō)明 根據(jù)需要準(zhǔn)備內(nèi)毒素綠?工作溶液的量。保持工作溶液避光。
 
2. 鱟變形細(xì)胞裂解物(LAL)工作溶液
將 500 μL 鱟變形細(xì)胞裂解物 (LAL) 儲(chǔ)備溶液加入 2 mL 無(wú)內(nèi)毒素水(組分 B)中,制成總體積為 2.5 mL 的鱟變形細(xì)胞裂解物 (LAL) 工作溶液。
注意 根據(jù)需要和使用前準(zhǔn)備LAL工作溶液的量。使用不含內(nèi)毒素的瓶子或管子。