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產(chǎn)品說明：
傳統(tǒng)的BCA蛋白質(zhì)測定廣泛用于定量蛋白質(zhì)。然而，它緩慢而乏味，例如，您必須在37°C下加熱BCA反應(yīng)30分鐘或在室溫下等待兩個小時。Amplite?? 比色法 BCA 蛋白定量檢測試劑盒是一種雙組分且與去垢劑兼容的檢測試劑盒，用于測定總蛋白濃度。該測定基于相同的銅螯合反應(yīng)，并提供與傳統(tǒng)的BCA蛋白測定相當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確性，后者在高溫下運行或具有更長的孵育時間。在 560 nm 附近監(jiān)測蛋白質(zhì)信號，并在 30 分鐘內(nèi)完成測定。它方便、快速、堅固，無需高溫。Amplite?? 比色 BCA 蛋白質(zhì)定量檢測試劑盒可以采用方便的 96 孔微量滴定板形式進行，無需分離步驟即可輕松適應(yīng)自動化。
 
組件
組件 A：   50毫升
組件 B：    1毫升
組分C：BSA標(biāo)準(zhǔn)品（2毫克/毫升）    1毫升
 
示例協(xié)議
 
一目了然
協(xié)議摘要

1. 制備支鏈氨基酸工作溶液（50 μL）
2. 添加 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品 （50 μL）
3. 在室溫下孵育 20 - 60 分鐘
4. 讀取 562 nm 處的吸光度（在 540-590 nm 范圍內(nèi)）

 
重要
使用前在室溫下解凍所有試劑盒組件。
 
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
BSA標(biāo)準(zhǔn)
將 80 μL 2 mg/mL BSA 標(biāo)準(zhǔn)品（組分 C）加入 320 μL PBS（未提供）中，生成 400 μg/mL BSA 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （BS1）。然后在PBS中使用1：2系列稀釋液以獲得連續(xù)稀釋的BSA標(biāo)準(zhǔn)品（BS2 - BS7）。注意：有必要在每次測定期間創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
 
工作溶液的制備
支鏈氨基酸工作解決方案

1. 通過將50份BCA溶液A（組分A）與1份BCA溶液B（組分B）（溶液A：B的v/v比）混合，制備所需的BCA工作溶液量。
2. 充分混合，直到BCA工作溶液呈均勻的淺綠色。

注意 1 mL BCA 工作溶液足以進行 20 次測試。
 
實驗方案樣本
表 1.BSA標(biāo)準(zhǔn)品和測試樣品在透明底部96孔微孔板中的布局。BS= BSA 標(biāo)準(zhǔn)品（BS1 - BS7，400 至 6.25 μg/mL）;BL=空白控件;TS=測試樣品

BS1	BS1	TS	TS
BS2	BS2	---	---
BS3	BS3
BS4	BS4
BS5	BS5
BS6	BS6
BS7	BS7
提單	提單

表 2.每個孔的試劑組成。

井	卷	試劑
BS1-BS7	50 微升	連續(xù)稀釋 （400-6.25 μg/mL）
提單	50 微升	PBS
TS	50 微升	測試樣品

 

1. 根據(jù)表1和表2中提供的布局制備BSA標(biāo)準(zhǔn)品（BS），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。
2. 向BSA標(biāo)準(zhǔn)品、空白對照和測試樣品的每個孔中加入50 μL BCA工作溶液，使總測定體積為100 μL/孔。
3. 將反應(yīng)在室溫下孵育20至60分鐘。
4. 用吸光度酶標(biāo)儀在OD 562nm（在540至590nm范圍內(nèi)）監(jiān)測吸光度。