產(chǎn)品說明:
過氧化*是一種活性氧代謝副產(chǎn)物,可作為許多氧化應(yīng)激相關(guān)狀態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。它涉及許多與哮喘、動脈粥樣硬化、糖尿病血管病變、骨質(zhì)疏松癥、許多神經(jīng)退行性疾病和唐氏綜合癥有關(guān)的生物事件。這種反應(yīng)性物質(zhì)的測量有助于確定氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)各種細(xì)胞內(nèi)途徑。該細(xì)胞計?細(xì)胞內(nèi)熒光過氧化*檢測試劑盒使用我們獨特的OxiVision? Blue過氧化物傳感器來量化活細(xì)胞中的過氧化*。OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器具有細(xì)胞滲透性,與過氧化*反應(yīng)時會產(chǎn)生藍(lán)色熒光。該試劑盒提供了一種靈敏的工具,用于監(jiān)測活細(xì)胞中的過氧化*水平,并經(jīng)過優(yōu)化,可用于熒光顯微鏡。
組件
組件 A:OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器 1瓶
組分B:檢測緩沖液 1 瓶 (20 mL)
組件C:DMSO 1 瓶 (100 μL)
示例協(xié)議
一目了然
協(xié)議摘要
重要說明
在開始實驗之前,在室溫下解凍所有試劑盒成分。
儲備液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
工作溶液的制備
將 10 μL 的 500X OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器儲備溶液加入 500 μL 檢測緩沖液(組分 B)中,并充分混合,制成 OxiVision?? 藍(lán)色過氧化物傳感器工作溶液。注意:此OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器工作溶液不穩(wěn)定;使用前根據(jù)需要準(zhǔn)備。
實驗方案樣本
過氧化*是一種活性氧代謝副產(chǎn)物,可作為許多氧化應(yīng)激相關(guān)狀態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。它涉及許多與哮喘、動脈粥樣硬化、糖尿病血管病變、骨質(zhì)疏松癥、許多神經(jīng)退行性疾病和唐氏綜合癥有關(guān)的生物事件。這種反應(yīng)性物質(zhì)的測量有助于確定氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)各種細(xì)胞內(nèi)途徑。該細(xì)胞計?細(xì)胞內(nèi)熒光過氧化*檢測試劑盒使用我們獨特的OxiVision? Blue過氧化物傳感器來量化活細(xì)胞中的過氧化*。OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器具有細(xì)胞滲透性,與過氧化*反應(yīng)時會產(chǎn)生藍(lán)色熒光。該試劑盒提供了一種靈敏的工具,用于監(jiān)測活細(xì)胞中的過氧化*水平,并經(jīng)過優(yōu)化,可用于熒光顯微鏡。
組件
組件 A:OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器 1瓶
組分B:檢測緩沖液 1 瓶 (20 mL)
組件C:DMSO 1 瓶 (100 μL)
示例協(xié)議
一目了然
協(xié)議摘要
- 在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞
- 使用OxiVision?藍(lán)色過氧化物傳感器對細(xì)胞進行染色
- 用測試化合物處理細(xì)胞
- 使用 DAPI 濾光片或防爆/電磁 = 405/450 nm 監(jiān)測熒光強度
重要說明
在開始實驗之前,在室溫下解凍所有試劑盒成分。
儲備液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
- OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器儲備溶液 (500X):
工作溶液的制備
將 10 μL 的 500X OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器儲備溶液加入 500 μL 檢測緩沖液(組分 B)中,并充分混合,制成 OxiVision?? 藍(lán)色過氧化物傳感器工作溶液。注意:此OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器工作溶液不穩(wěn)定;使用前根據(jù)需要準(zhǔn)備。
實驗方案樣本
- 在 10 孔細(xì)胞板中每孔 96 μL 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入 2 μL/孔(5 孔板)或 384.90 μL/孔(96 孔板)的 OxiVision? 藍(lán)色過氧化物傳感器工作溶液,或在 22 孔細(xì)胞板中每孔加入 5.384 μL 細(xì)胞培養(yǎng)物。注意:染色前無需清洗細(xì)胞。建議在全培養(yǎng)基中對細(xì)胞進行染色。
- 用測試化合物在全培養(yǎng)基中或在所需的緩沖液中在 37°C 下處理細(xì)胞所需的時間。對于對照樣品(未處理的細(xì)胞),加入相應(yīng)量的復(fù)合緩沖液。注意:建議在全培養(yǎng)基中處理細(xì)胞。但是,如果測試化合物對血清敏感,則可以在治療前吸走生長培養(yǎng)基和血清因子。抽吸后,將1X Hank的鹽溶液和20 mM Hepes緩沖液(HHBS)或您選擇的緩沖液添加到細(xì)胞中。或者,可以在無血清培養(yǎng)基中處理細(xì)胞。我們在100°C的全培養(yǎng)基中用37μM過氧化*處理Jurkat細(xì)胞90分鐘以誘導(dǎo)過氧化*。
- 用DPBS洗滌細(xì)胞1-2次,并更換為100 uL /孔(用于96孔板)或25 uL /孔(用于384孔板)測定緩沖液(組分C)。
- 使用帶有DAPI濾光片的熒光顯微鏡拍攝圖像。



