產(chǎn)品說明：
活性氧（ROS）是含有氧的化學(xué)反應(yīng)分子。實(shí)例包括超氧化物、羥基自由基、單線態(tài)氧和過氧化物。由于存在不成對的價殼電子，ROS具有高度反應(yīng)性。ROS是氧氣正常代謝的天然副產(chǎn)物，在細(xì)胞信號傳導(dǎo)和體內(nèi)平衡中具有重要作用。然而，在環(huán)境壓力（例如紫外線或熱暴露）期間，ROS水平會急劇增加。這可能會對細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成嚴(yán)重?fù)p害。累積起來，這被稱為氧化應(yīng)激。ROS也是由電離輻射等外源產(chǎn)生的。在氧化應(yīng)激條件下，ROS的產(chǎn)生急劇增加，導(dǎo)致膜脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸隨后發(fā)生改變。這些生物分子的氧化損傷與衰老以及各種病理事件有關(guān)，包括動脈粥樣硬化、致癌、缺血性再灌注損傷和神經(jīng)退行性疾病。ROS Brite? APF是一種熒光探針，使用常規(guī)熒光顯微鏡，高內(nèi)涵成像，微孔板熒光測定或流式細(xì)胞術(shù)測量細(xì)胞中的羥基自由基。細(xì)胞通透性ROS Brite? APF試劑是無熒光的，與羥基自由基反應(yīng)時產(chǎn)生亮綠色熒光。所得熒光可以使用熒光成像、高內(nèi)涵成像、微孔板熒光測定或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行測量。在過氧化物酶存在下，APF也與過氧化氫反應(yīng)。與其他ROS相比，APF對羥基自由基具有良好的選擇性。APF和HPF對光誘導(dǎo)氧化表現(xiàn)出相對較高的抵抗力。APF 和 HPF 在與羥基自由基或過氧亞硝酸鹽陰離子反應(yīng)之前是無熒光的。APF也會與次氯酸鹽陰離子發(fā)生反應(yīng)。
平臺
熒光顯微鏡
Excitation FITC過濾器套件
Emission FITC過濾器套件
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格 FITC過濾器套件
示例協(xié)議
一目了然
儲備液的制備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. ROS 燦燦? APF 儲備溶液：
在 DMSO 中制備 10 至 20 mM 的 ROS? 燦燦 APF 儲備溶液。注意：儲備溶液可以儲存在-20oC在一次性等分報價中。避光。
工作溶液的制備
ROS Brite? APF工作溶液：
通過將DMSO儲備溶液稀釋到帶有1mMHepes緩沖液（HHBS）的Hanks溶液中，制成10至20μM工作溶液。注意：工作溶液在使用前應(yīng)新鮮。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
| 分子量 423.42 |
激發(fā)（納米） 498 |
發(fā)射（納米） 517 |
活性氧（ROS）是含有氧的化學(xué)反應(yīng)分子。實(shí)例包括超氧化物、羥基自由基、單線態(tài)氧和過氧化物。由于存在不成對的價殼電子，ROS具有高度反應(yīng)性。ROS是氧氣正常代謝的天然副產(chǎn)物，在細(xì)胞信號傳導(dǎo)和體內(nèi)平衡中具有重要作用。然而，在環(huán)境壓力（例如紫外線或熱暴露）期間，ROS水平會急劇增加。這可能會對細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成嚴(yán)重?fù)p害。累積起來，這被稱為氧化應(yīng)激。ROS也是由電離輻射等外源產(chǎn)生的。在氧化應(yīng)激條件下，ROS的產(chǎn)生急劇增加，導(dǎo)致膜脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸隨后發(fā)生改變。這些生物分子的氧化損傷與衰老以及各種病理事件有關(guān)，包括動脈粥樣硬化、致癌、缺血性再灌注損傷和神經(jīng)退行性疾病。ROS Brite? APF是一種熒光探針，使用常規(guī)熒光顯微鏡，高內(nèi)涵成像，微孔板熒光測定或流式細(xì)胞術(shù)測量細(xì)胞中的羥基自由基。細(xì)胞通透性ROS Brite? APF試劑是無熒光的，與羥基自由基反應(yīng)時產(chǎn)生亮綠色熒光。所得熒光可以使用熒光成像、高內(nèi)涵成像、微孔板熒光測定或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行測量。在過氧化物酶存在下，APF也與過氧化氫反應(yīng)。與其他ROS相比，APF對羥基自由基具有良好的選擇性。APF和HPF對光誘導(dǎo)氧化表現(xiàn)出相對較高的抵抗力。APF 和 HPF 在與羥基自由基或過氧亞硝酸鹽陰離子反應(yīng)之前是無熒光的。APF也會與次氯酸鹽陰離子發(fā)生反應(yīng)。
平臺
熒光顯微鏡
Excitation FITC過濾器套件
Emission FITC過濾器套件
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格 FITC過濾器套件
示例協(xié)議
一目了然
儲備液的制備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. ROS 燦燦? APF 儲備溶液：
在 DMSO 中制備 10 至 20 mM 的 ROS? 燦燦 APF 儲備溶液。注意：儲備溶液可以儲存在-20oC在一次性等分報價中。避光。
工作溶液的制備
ROS Brite? APF工作溶液：
通過將DMSO儲備溶液稀釋到帶有1mMHepes緩沖液（HHBS）的Hanks溶液中，制成10至20μM工作溶液。注意：工作溶液在使用前應(yīng)新鮮。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
- 用 ROS Brite? APF （1-10 μM） 在 20°C 下孵育細(xì)胞 60 - 37 分鐘。
- 用HHBS緩沖液替換染料上樣溶液。
- 使用適當(dāng)?shù)臒晒鈨x器在Ex / Em = 490 / 525 mm（截止= 515 nM）下以底部讀取模式分析細(xì)胞（例如，用于熒光顯微鏡的FITC濾光片組，用于流式細(xì)胞儀的FL1濾光片）。注意：BSA和酚紅會影響熒光，應(yīng)謹(jǐn)慎使用。APF 可用于溶液測定或細(xì)胞內(nèi)測量。