麻豆国产av超爽剧情系列,久久久久精品国产三级,久久久久久伊人高潮影院,久久99精品国产麻豆不卡,久久亚洲中文字幕不卡一二区

產(chǎn)品說明：
一氧化氮（NO）是一種重要的生物調(diào)節(jié)因子，參與許多生理和病理過程。NO生成改變與各種免疫，心血管，神經(jīng)退行性和炎癥性疾病有關(guān)。作為一種自由基，NO被迅速氧化，體內(nèi)存在的NO濃度相對(duì)較低。檢測和理解NO在生物系統(tǒng)中的作用一直具有挑戰(zhàn)性。細(xì)胞計(jì)?熒光法細(xì)胞內(nèi)一氧化氮檢測試劑盒提供了一種靈敏的工具，用于監(jiān)測活細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)NO水平。我們的試劑盒中開發(fā)并使用了硝酸?探針，作為DAF-2的 jue jia 替代品，用于檢測和成像細(xì)胞中的游離NO。與常用的DAF-2探針相比，硝酸?探針具有更好的光穩(wěn)定性和增強(qiáng)的細(xì)胞通透性。該特殊試劑盒使用硝?基紅，可以與NO反應(yīng)產(chǎn)生具有類似于德克薩斯紅?光譜特性的亮紅色熒光產(chǎn)物。Nitrixyte? Red可以很容易地加載到活細(xì)胞中，并且可以使用Red濾光片組方便地監(jiān)測其熒光信號(hào)。該試劑盒針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。
平臺(tái)
流式細(xì)胞儀
Excitation：488 nm 激光
Emission：610/20 nm 濾光片
儀器規(guī)格：德州紅色頻道
組件
組分A：500X氮化硅紅色?     1 瓶 （100 μL）
組分B：非陽性對(duì)照    1瓶（凍干粉）
組分C：檢測緩沖液‘’1‘’ ‘’瓶‘’ ‘’（‘’1‘’0‘’ ‘’m‘’L‘’）‘’

1. ‘’準(zhǔn)‘’備‘’細(xì)‘’胞‘’：‘’（‘’0‘’.‘’5‘’ ‘’-‘’ ‘’1‘’ב’1‘’0‘’6‘’細(xì)‘’胞‘’/毫升）
2. 加入 1 μL：合物和硝酸?紅在37oC下孵育細(xì)胞所需的時(shí)間
3. 使用610/20 nm濾光片用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞

重要事項(xiàng)：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍所有組分。
儲(chǔ)備溶液的制備：
除非另有說明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
非酸陽性對(duì)照治療儲(chǔ)備溶液（50 mM）
將 200 uL ddH 2 O 加入 NONOate 陽性對(duì)照（組分 B）的小瓶中，制成 50 mM NONOacte 陽性對(duì)照治療儲(chǔ)備溶液。
工作溶液的制備
用測定緩沖液（組分C）稀釋50 mM NONOate陽性對(duì)照處理儲(chǔ)備溶液，制成1-2 mM NONOate陽性對(duì)照工作溶液。
實(shí)驗(yàn)方案樣本

1. 對(duì)于每個(gè)樣品，在您選擇的 0.5 mL 溫?zé)崤囵B(yǎng)基或緩沖液中制備細(xì)胞，密度為 5×105至 1×106細(xì)胞/毫升。注意：應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每個(gè)細(xì)胞系，以確定NO誘導(dǎo)的最佳細(xì)胞密度。
2. 將 1 μL 500X 亞硝酸?紅（組分 A）加入 0.5 mL 細(xì)胞懸液中。注意：對(duì)于貼壁細(xì)胞，用0.5mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整，并在用硝酸?紅孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞一次。
3. 將細(xì)胞與測試化合物和硝酸?紅在37oC下孵育所需的時(shí)間，以產(chǎn)生內(nèi)源性或外源性NO。 注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所使用的單個(gè)細(xì)胞類型和測試化合物。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。注意：我們使用 Raw 264.7 細(xì)胞在 20 oC 的細(xì)胞培養(yǎng)基中與硝酸?紅工作溶液、1 μg/mL 脂多糖 （LPS） 和 37 mM L-精an酸 （L-Arg） 一起孵育 16 小時(shí)。
4. 將用硝基?紅預(yù)孵育30分鐘的細(xì)胞旋轉(zhuǎn)下來。用1mM DEA NOate陽性對(duì)照工作溶液重懸細(xì)胞，并在37oC下再孵育30分鐘。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見圖 1。
5. 使用流式細(xì)胞儀中的610/20 nm濾光片監(jiān)測熒光強(qiáng)度。對(duì)感興趣的細(xì)胞進(jìn)行門控，不包括碎片。