產(chǎn)品說明:
Bioquest的MycoLight?快速熒光革蘭氏陽性細菌染色試劑盒為測定活細菌中的革蘭氏體征提供了一種新穎的一步熒光檢測方法。革蘭染色是臨床和研究環(huán)境中細菌分類學(xué)分類的一種重要且廣泛使用的方法。原始方法涉及相當(dāng)多的步驟,如熱固定,兩步染色方案,酒精提取和復(fù)染。這些步驟可能會導(dǎo)致染色不一致。亞洲空運中心Bioquest的一步式套件通過消除勞動密集型步驟來克服現(xiàn)有問題。該試劑盒使用熒光標記的刀豆球蛋白A(ConA),這是一種凝集素,選擇性地與暴露在革蘭氏陽性細菌表面的N-乙酰氨基葡萄糖結(jié)合。當(dāng)革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細菌用熒光標記的ConA偶聯(lián)物染色時,只有革蘭氏陽性細菌發(fā)出紅色熒光。染色的細菌可以通過熒光計監(jiān)測。我們的試劑盒堅固方便,因為我們試劑盒中使用的熒光標記ConA偶聯(lián)物比其他現(xiàn)有染料具有更高的亮度和光穩(wěn)定性。
平臺
熒光顯微鏡
Excitation:650 納米
Emission:669 納米
推薦板:黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格:Cy5過濾器
組件
組件A:IF647-ConA:2瓶
組分B:檢測緩沖液:1瓶(25 mL)
儲備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
IF647-ConA 儲備液 (100X)
將 50 μL 檢測緩沖液(組分 B)加入一瓶 IF647-ConA(組分 A)中并充分混合。
注意將儲備溶液儲存在-20°C,避免光照并以較小的等分試樣儲存,以避免重復(fù)凍融循環(huán)。
實驗方案樣本
細菌樣品的制備
Bioquest的MycoLight?快速熒光革蘭氏陽性細菌染色試劑盒為測定活細菌中的革蘭氏體征提供了一種新穎的一步熒光檢測方法。革蘭染色是臨床和研究環(huán)境中細菌分類學(xué)分類的一種重要且廣泛使用的方法。原始方法涉及相當(dāng)多的步驟,如熱固定,兩步染色方案,酒精提取和復(fù)染。這些步驟可能會導(dǎo)致染色不一致。亞洲空運中心Bioquest的一步式套件通過消除勞動密集型步驟來克服現(xiàn)有問題。該試劑盒使用熒光標記的刀豆球蛋白A(ConA),這是一種凝集素,選擇性地與暴露在革蘭氏陽性細菌表面的N-乙酰氨基葡萄糖結(jié)合。當(dāng)革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細菌用熒光標記的ConA偶聯(lián)物染色時,只有革蘭氏陽性細菌發(fā)出紅色熒光。染色的細菌可以通過熒光計監(jiān)測。我們的試劑盒堅固方便,因為我們試劑盒中使用的熒光標記ConA偶聯(lián)物比其他現(xiàn)有染料具有更高的亮度和光穩(wěn)定性。
平臺
熒光顯微鏡
Excitation:650 納米
Emission:669 納米
推薦板:黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格:Cy5過濾器
組件
組件A:IF647-ConA:2瓶
組分B:檢測緩沖液:1瓶(25 mL)
- 制備細菌樣品
- 準備并添加IF647-ConA儲備溶液
- 用IF647-ConA在室溫下在黑暗中孵育細菌樣品5-15分鐘
- 取出IF647-ConA染色溶液并重懸于檢測緩沖液中
- 使用帶有Cy5濾光片組的熒光顯微鏡分析樣品
儲備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
IF647-ConA 儲備液 (100X)
將 50 μL 檢測緩沖液(組分 B)加入一瓶 IF647-ConA(組分 A)中并充分混合。
注意將儲備溶液儲存在-20°C,避免光照并以較小的等分試樣儲存,以避免重復(fù)凍融循環(huán)。
實驗方案樣本
細菌樣品的制備
- 在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中將細菌培養(yǎng)到對數(shù)后期。制備濃度在 10 范圍內(nèi)的細菌樣品6到 108細胞/毫升。
- 通過以10,000×g離心5分鐘除去培養(yǎng)基,并將沉淀重新懸浮在測定緩沖液(組分B)中。
- 將 1 μL IF647-ConA 儲備溶液 (100X) 加入到 100 μL 細菌樣品中。
- 充分混合并在室溫下在黑暗中孵育 5-15 分鐘。
- 以 10,000 x g 離心 5 分鐘,然后取出 IF647-ConA 染色溶液。
- 重懸于 100 μL 測定緩沖液(組分 B)中。
- 用熒光顯微鏡通過Cy5(Ex / Em = 650 / 669 nm)通道監(jiān)測細菌的熒光。



